消癌平注射液體外作用于HEL細胞株的實驗研究
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醫(yī)學信息
?2506??。危铮埂。玻埃保啊?/p>
藥物與臨床
諾氟沙星組治愈率為73.3%,而熱淋清顆粒與諾氟沙星合用治療組治愈率
為93.3%,總有效率為95%。此外,本組的結(jié)果還顯示,使用熱淋清顆粒可
明顯縮短尿路感染癥狀及體征的消失時間,并能提高細菌清除率;其與諾氟
沙星聯(lián)合應用產(chǎn)生協(xié)同作用,可作為治療尿路感染的一種有效藥物。同時,
使用熱淋清顆粒治療尿路感染,可以避免因長期、大量使用抗生索而導致的
耐藥菌增加、菌失調(diào)和損害肝腎功能等缺點,在臨床使用中,未發(fā)現(xiàn)明顯
的毒副作用?!?/p>
熱淋清顆粒是一種純中藥制劑,為棕至深褐顆粒,氣味芳香,口服
大腸桿菌l2例,變形桿菌1例,)治療后12例細菌被清除,細菌清除率為
92.3(12/13)。
兩組細菌清除率的差別經(jīng)fisher直接概率法檢驗,P<0.05,認為熱淋清
顆粒加諾氟沙星組細菌清除率優(yōu)于單用諾氟沙星組?!?/p>
2.4不良反應的比較。諾氟沙星組中,不良反應發(fā)生率為13.3%(2/
l5),表現(xiàn)為惡心1例,嘔吐1例;熱淋清顆粒加諾氟沙星組中,不良反應發(fā)
生率為6.9%(1/15),表現(xiàn)為胃部不適。治療前后兩組病人均未見周圍血中
自細胞計數(shù)明顯下降及肝腎功能的損害。兩組不良反應率的差別經(jīng)fisher
直接概率法檢驗差異為顯著性(P>0.05)。 劑型,臨床使用方便,患者依從性較好,值得推廣使用。另外,熱林清顆粒為
3.討論 無糖型,對糖尿病患者,尤為適用?!?/p>
熱淋清顆粒是根據(jù)貴州民間流傳的苗藥驗方,精選貴州傳統(tǒng)藥材蓼科
植物頭花蓼(頭花蓼又稱石莽草,為我國西南地區(qū)特有的藥用植物,主要產(chǎn)
參考文獻
于貴州省)為主要原料,采用現(xiàn)代提取工藝,提取精制而成的口服顆粒劑?!?/p>
[1]吳階平.泌尿外科.濟南:山東科學技術(shù)出版社,1993:62—69.
具有清熱解毒、抗菌消炎、利尿通淋、活血消腫之功效,常用于急慢性腎盂腎
[2] 馮永山,白兆震.熱淋清顆粒治療非琳球菌性尿道炎的療效觀察.臨床
炎、膀胱炎、尿道炎、尿路結(jié)石、前列腺炎、炎、盆腔炎、宮頸炎、淋病及性
泌尿外科雜志,2ool,16(12):543.
病后遺癥等治療。藥理實驗對金黃葡萄球菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、痢疾
[3] 吳勇,潘正躍,等.熱淋清顆粒治療尿路感染的臨床研究觀察.『}缶床泌
桿菌、綠膿桿菌、變形桿菌、淋球菌等革蘭氏陽性、陰性菌有優(yōu)良的抗菌作
尿外科雜志,1606—8106(2oo3)l2—1797一O2.
用。本組觀察發(fā)現(xiàn)該藥在臨床治療尿路感染中有顯著輔助療效作用。單用
消癌平注射液體外作用于HEL細胞株的實驗研究
方奕奇
南京中醫(yī)藥大學,江蘇南京210046
【摘要】目的:探討消癌平注射液對白血病細胞的抑制和凋亡作用。方法:以消癌平注射液處理JAK2突變的人紅白血?。龋牛讨?,M1Tr法檢測其對細胞
的抑制作用,Amexin?。郑校呻p染法檢測細胞的凋亡程度。結(jié)果:高濃度的消癌平注射液(60u ̄ml,70u ̄ml,80ul/ml,90u ̄m1),時HEL細胞均有抑制作用,且
呈劑量依賴。經(jīng)統(tǒng)計學分析有差異。消癌平注射液達到一定濃度時(50u ̄ml,75u ̄m1),未顯示誘導細胞凋亡的作用,更高濃度(1oouI/mI)導致細胞直接死
亡。結(jié)論:高濃度的消癌平注射液對人紅白血病HEL細胞有抑制作用,且呈量效關系。消癌平注射液對誘導HEL細胞凋亡無明顯影響?!?/p>
【關鍵詞】通關藤;細胞凋亡;抗腫瘤;流式細胞術(shù);JAK2
doi:10.3969/j.issn.1006—1959.2010.09.252 文章編號:1006—1959(2010)一09—25o6一O2
Bet—abl陰性的骨髓增殖性腫瘤(MPN)一直是臨床治療的難點,2oo5
1.2.3?。粒睿睿澹椋睢。郑校呻p染法檢測細胞凋亡:取對數(shù)生長期細胞,以每孔
年JAl(2?。郑叮保罚泣c突變的發(fā)現(xiàn)使得人們對bcr—abl陰性的MPN的發(fā)病機制
1×10 個/ml細胞接種于培養(yǎng)瓶。實驗組加消癌平注射液的培養(yǎng)液,使其最
有了新的認識,分子機制的明確促進了MPN分子靶向抑制治療的研究進
終濃度分別為25u ̄mL,50u ̄mL,75u ̄mL,l00uL/mL。培養(yǎng)24h。離心,去
程,多種JAl(2抑制劑正在進行臨床前研究,有些已經(jīng)進入fI缶床驗證階段,初
上清,用PBS洗滌細胞兩次。用400ul?。保亍。拢椋睿洌椋睿纭。拢酰颍驊腋〖毎?,濃度大約
步結(jié)果顯示體內(nèi)外均有抑制JAK2相關的信號途徑的作用。但其研發(fā)成本
為1×10 個/ 。在細胞懸浮液中加入5ul?。粒睿睿澹睢。帧。疲桑?、C,輕輕混勻后于2
及治療費用均偏高,且其可預測副作用較大。因此,有必要尋求療效好、毒 —8℃避光條件下孵育15分鐘。加入10ul?。校珊筝p輕混勻于2—8℃避光條件
副作用小的新的治療方法和藥物。而運用中藥治療惡性腫瘤,越來越被廣 下孵育5分鐘。在1小時內(nèi)用流式細胞儀檢測?!?/p>
大學者和患者接受,是惡性腫瘤綜合治療中的有效手段之一?!?/p>
1.2.4統(tǒng)計學分析:應用統(tǒng)計軟件sPss11.0進行統(tǒng)計學處理,統(tǒng)計方
通關藤,又稱通光藤、烏骨藤,系蘿摩科牛奶菜屬植物通光散的藤莖,始
法采用t檢驗和x 檢驗?!?/p>
載于‘滇南本草)¨3,分布于云南和貴州,性味苦,微甘、涼,人肺胃膀胱經(jīng), 以a=0.05作為檢驗水準?!?/p>
具有抗癌、免疫調(diào)節(jié)、降壓、戒毒作用及保肝利尿、恢復腫瘤患者放療、化療?。玻Y(jié)果
后白細胞下降等作用?!跋┢健睘槠涑伤幧唐访?。本實驗通過體外抗腫瘤?。玻薄Γ龋牛伞〖毎囊种谱饔谩2煌瑵舛鹊南┢阶⑸湟鹤饔糜隗w外
實驗方法觀察了通關藤制劑一消癌平注射液,體外抗JAl(2突變的人紅白血 培養(yǎng)的HEL細胞24h后,用MTr法測定其對細胞增殖的抑制作用。MTT結(jié)
病HEL細胞株活性,并應用細胞生物學及分子生物學技術(shù)探討了消癌平注 果顯示消癌平注射液對HEL細胞具有顯著的抑制作用,實驗組與對照組比
射液體外抗腫瘤作用的可能機制?!?/p>
較,高濃度組(60u ̄ml,70ul/m1,80u ̄ml,9Ou Hd)OD值差異有統(tǒng)計學意義
1.材料與方法
(P<0.01)。當濃度為6ouL/mL,70u ̄mL,80u ̄mL,90u ̄mL時,其抑制率
1.1材料:人紅白血?。龋牛碳毎?,購自中國科學院細胞庫。(經(jīng)Real—
隨濃度的降低有所下降,在一定范圍內(nèi)呈濃度依賴性?!?/p>
time?。校悖覚z測,本細胞含有JA ̄V617F純合突變)。消癌平注射液(2OmL/?。玻擦魇郊毎麅x檢測細胞凋亡。不同濃度消癌平注射液對HEL細胞
支):由南京圣和藥業(yè)有限公司提供。四甲基偶氮唑藍(MTT):上海生工生
處理后。第24h可見濃度在25uL/ml時凋亡率低于對照組,濃度在50uL/ml
物工程有限公司。胎牛血清:CIBCO公司。RPMI一164O粉:GIBCO公司?!∫陨蠒r細胞凋率可超過對照組,1o0uL/Ⅱd細胞95.5%死亡。第48h可見濃
凋亡檢測試劑盒:BESTBIO公司?!?/p>
度在25u ̄ml時凋亡率仍低于對照組,濃度在5OuL/ITll時細胞凋率可超過對
1.2方法:
照組,75u ̄ml以上細胞大部分死亡。第48h可見濃度在25uL/ 時凋亡率
1.2.1細胞培養(yǎng):HEL細胞懸浮生長于含10%胎牛血清的RPMI一
仍低于對照組,且與濃度在5OuL/m1時細胞凋率無明顯差異,75uL/ 以上
1640培養(yǎng)基中,在37℃,體積分數(shù)為5%的CO2飽和濕度下培養(yǎng)。取狀態(tài)良 細胞大部分死?!?/p>
好、處于對數(shù)生長期HEL細胞進行實驗。
3.討論
1.2.2?。危В桑员确z測細胞增殖:取待檢細胞與培養(yǎng)液配成懸液,以
本實驗結(jié)果表明,消癌平注射液不同劑量組作用于HEL細胞24h于陰
每孔1?。。保啊€細胞接種于96孔培養(yǎng)板中。實驗組加消癌平注射液的培養(yǎng) 性對照組比較。只用在較高濃度下(50u ̄mL,6ouI/mL,70u ̄mL,80u ̄mL,
液,使其最終濃度分別為lOu ̄mL,20u ̄mL,30u ̄mL,4ouL/mL,50u ̄mL,
90u ̄mL)有統(tǒng)計學意義(P<0.O1),表明通關藤注射液在濃度50u ̄mL以
60uL/mL,70u ̄mL,80u ̄mL,90u ̄mL,同時設不加藥陰性對照和本底對照 上可以顯著抑制HEL細胞的增殖。且隨著藥物濃度的升高,抑制率升高?!?/p>
孔(不含細胞的等體積含相應濃度藥物培養(yǎng)液),每組設5個復孔,每孔
本研究用流式細胞儀檢測了不同濃度消癌平注射液對HEL細胞處理24h、
2oouL。每 L加入MTr溶液(5mg/mL)2OuL?。常贰胬^續(xù)孵育4h,離心,去上清?!?/p>
48h、72h后細胞凋亡情況,數(shù)據(jù)表明藥物達到一定濃度時仍無法顯著促進細
每孔加入150uL?。模停樱?,振蕩溶解3OfIlin。用自動酶標儀測定49Ohm波長下
胞加速凋亡,且繼續(xù)提高濃度只能促進細胞直接壞死。實驗結(jié)果提示注射
的吸光度(A),計算細胞增殖抑制率?。?。
液對人紅白血?。龋牛碳毎恼{(diào)亡無明顯影響,其抑制細胞生長的機制可能
細胞生長抑制率:(對照組OD均值一實驗組OD均值)/對照組OD均
并不是通過誘導凋亡來實現(xiàn)的?!?/p>
值×100%?!?/p>
雖然多有文獻報導“消癌平”有誘導細胞凋亡的作用,但研究表明其對
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