研究人員9月17日在“ 細(xì)胞報(bào)道 ”雜志上表示，接種一種埃博拉病毒，該病毒在一種名為VP35的蛋白質(zhì)??中具有突變，不會(huì)引起疾病并引發(fā)猴子的保護(hù)。研究結(jié)果表明，VP35的免疫逃避功能是一種潛在的藥物靶點(diǎn)，如果采取預(yù)防措施以防止逆轉(zhuǎn)為毒力，將來有可能開發(fā)減毒埃博拉病毒疫苗。

“這不是下一個(gè)埃博拉病毒疫苗，但該研究確實(shí)表明，有可能產(chǎn)生埃博拉病毒，這些病毒可以在細(xì)胞培養(yǎng)中生長并誘導(dǎo)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)，但會(huì)降低科學(xué)家的風(fēng)險(xiǎn)，”共同高級(jí)研究作者克里斯托弗說。佐治亞州立大學(xué)的巴斯勒。“這種突變病毒可能有助于安全地研究許多埃博拉病毒的功能。”

埃博拉病毒病是人類罕見但嚴(yán)重的致命疾病。直到2013年底，埃博拉病毒主要在中非造成零星和孤立的爆發(fā)。但是，影響超過28,000人的2013-2016流行病導(dǎo)致11,000多人死亡，并且病例從西非傳播到歐洲和美國。隨后在剛果民主共和國爆發(fā)的疫情進(jìn)一步突出了解導(dǎo)致埃博拉病毒毒力的因素的重要性。

目前，尚未證實(shí)可以中和病毒的許可治療，但正在開發(fā)一系列治療方法。用于預(yù)防埃博拉病毒的疫苗也正在開發(fā)中，并已用于幫助控制幾內(nèi)亞和剛果民主共和國爆發(fā)的疫情。“目前大多數(shù)埃博拉候選疫苗僅表達(dá)一種病毒蛋白，即糖蛋白，但感染后存活的患者會(huì)對其他病毒蛋白產(chǎn)生強(qiáng)大的T細(xì)胞反應(yīng)，”Basler說。“這表明表達(dá)所有病毒蛋白的候選疫苗可能會(huì)引發(fā)更廣泛的，可能更有效的免疫反應(yīng)。”

在這項(xiàng)新研究中，Basler與德克薩斯大學(xué)醫(yī)學(xué)分院的Thomas Geisbert，加州大學(xué)歐文分校的Ilhem Messaoudi和明尼蘇達(dá)州羅切斯特市梅奧診所的Hideki Ebihara合作開發(fā)了一種表達(dá)全部的突變病毒。埃博拉病毒基因并具有實(shí)際埃博拉病毒顆粒的結(jié)構(gòu)。他們在VP35蛋白中產(chǎn)生了具有三個(gè)突變的病毒，其在逃避宿主免疫應(yīng)答中起重要作用。

具體而言，已知VP35抑制稱為I型干擾素的免疫系統(tǒng)蛋白的產(chǎn)生并抑制樹突細(xì)胞的成熟，所述樹突細(xì)胞將抗原呈遞給T細(xì)胞并充當(dāng)先天免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)之間的信使。“我們想確定VP35的這些功能如何影響埃博拉病毒病并在最能反映人類疾病的動(dòng)物模型中寄主免疫反應(yīng)，”巴斯勒說。

先前的一項(xiàng)研究表明，用VP35-突變體埃博拉病毒感染可以保護(hù)豚鼠免受隨后用豚鼠適應(yīng)的埃博拉病毒的攻擊。但一般而言，與非人類靈長類動(dòng)物模型相比，嚙齒類動(dòng)物模型更容易受到抗病毒或疫苗方法的挑戰(zhàn)，后者易受引起人類疾病的相同埃博拉病毒株的影響。“我們之前的研究也沒有仔細(xì)評估對VP35-突變埃博拉病毒的免疫反應(yīng)，正如我們在研究中所做的那樣，”巴斯勒說。

為了測試他們的突變病毒是否會(huì)保護(hù)非人靈長類動(dòng)物免受埃博拉感染，研究人員用它來接種三只食蟹猴 - 動(dòng)物模型，作為評估埃博拉病毒毒力的金標(biāo)準(zhǔn)。用突變病毒感染激活抗原呈遞和先天免疫途徑，并引起增殖記憶T細(xì)胞和B細(xì)胞的頻率增加和抗體的產(chǎn)生。

28天后，研究人員用致死劑量的未經(jīng)修飾的埃博拉病毒攻擊了猴子。兩只猴子活了下來，沒有任何疾病跡象，但有一只猴子在九天后死亡。為了誘導(dǎo)更具保護(hù)性的反應(yīng)，研究人員用更高劑量的突變病毒接種了五只獼猴。疫苗接種導(dǎo)致三只猴子患上輕度疾病。這次，所有動(dòng)物在以比未修飾的埃博拉病毒的標(biāo)準(zhǔn)100%致死攻擊劑量高300倍的劑量進(jìn)行攻擊后存活，沒有可檢測的臨床體征。但大多數(shù)猴子表現(xiàn)出暫時(shí)的血液學(xué)變化，如血小板計(jì)數(shù)低或白細(xì)胞數(shù)量低。

“這些數(shù)據(jù)表明，VP35是一種關(guān)鍵的埃博拉病毒免疫逃逸因子，可以提供對埃博拉病毒控制免疫機(jī)制的見解，”巴斯勒說。“我們證明VP35抑制干擾素反應(yīng)是埃博拉病毒引起疾病的關(guān)鍵要求，VP35功能不僅影響先天的抗病毒防御，還影響適應(yīng)性免疫反應(yīng)。因?yàn)樗鼘Χ玖χ陵P(guān)重要，VP35的干擾素抑制功能是潛在的藥物目標(biāo)。“

即使突變的埃博拉病毒高度減毒并且可以免疫非人靈長類動(dòng)物，它在細(xì)胞培養(yǎng)物中表現(xiàn)出令人驚訝的強(qiáng)大復(fù)制。“這種特征組合使得突變埃博拉病毒可能適用于研究，而不會(huì)受到生物安全4級(jí)遏制所帶來的挑戰(zhàn)性限制，這種遏制用于最危險(xiǎn)的微生物，”Basler說。

作者說，突變病毒還不適合作為疫苗，因?yàn)樗紫缺仨毧朔O(jiān)管障礙，并確保多種不同的減毒突變可以防止病毒恢復(fù)并變得毒性。在未來的研究中，研究人員計(jì)劃研究是否可以使用類似的方法來減弱相關(guān)病毒。他們還有興趣發(fā)現(xiàn)其他突變，這些突變?nèi)匀辉试S病毒復(fù)制，同時(shí)防止病毒引起疾病。