眾所周知，CD19絕對(duì)稱得上是CAR-T治療靶點(diǎn)中的當(dāng)家花旦，已經(jīng)在復(fù)發(fā)難治性B細(xì)胞惡性血液疾病獲得了極大的成功，并且已經(jīng)有兩款商業(yè)化產(chǎn)品，用于治療復(fù)發(fā)難治性急性B細(xì)胞性淋巴細(xì)胞白血病(B-ALL)和復(fù)發(fā)難治性非霍奇金淋巴瘤(NHL)。

但并不是所有患者都能從CD19 CAR-T療法中獲益。例如，多數(shù)臨床數(shù)據(jù)報(bào)道顯示CD19 CAR-T在復(fù)發(fā)難治性NHL患者中的客觀緩解率(ORR)為80%，完全緩解率(CR)約50%，仍然存在將近20%的無(wú)應(yīng)答以及超過(guò)一半的患者無(wú)法達(dá)到持續(xù)緩解。

部分NHL患者不能從CD19 CAR-T療法中獲益

那為什么部分非霍奇金淋巴瘤患者不能從中獲益呢?原因何在呢?

因?yàn)檫@些患者的癌細(xì)胞上會(huì)存在丟失CD19抗原的情況，所以針對(duì)此類患者，CD19 CAR-T就不再具有靶向和攻擊癌細(xì)胞的能力了，進(jìn)而還會(huì)導(dǎo)致癌癥的復(fù)發(fā)。

那如何解決這個(gè)問(wèn)題呢?

以CD20為靶點(diǎn)的CAR-T療法或許能夠成為替代解決方案。所以今天小編要給大家介紹的主角就是B細(xì)胞惡性腫瘤的另一個(gè)熱門靶標(biāo)—CD20。

CD20是一種人B淋巴細(xì)胞限制性分化抗原，由MS4A1基因編碼(位于11q12)，該抗原為一種疏水性4次跨膜蛋白，分子量大約為35kD，別名有B淋巴細(xì)胞表面抗原B1、Bp35、白細(xì)胞表面抗原Leu-16、跨膜4域亞家族A成員1等。該蛋白功能可能涉及調(diào)節(jié)B細(xì)胞活化和增殖，可能作為鈣離子通道發(fā)揮作用。

由上圖可以看出，CD20抗原主要存在于前B和成熟B淋巴細(xì)胞上，表達(dá)于大部分B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞上，但不表達(dá)于干細(xì)胞、原B細(xì)胞、正常漿細(xì)胞或者其他正常組織。漿細(xì)胞幼稚細(xì)胞和刺激后的漿細(xì)胞可能表達(dá)CD20。

根據(jù)CD20在B淋巴細(xì)胞發(fā)育階段的表達(dá)特點(diǎn)，其已經(jīng)被選定為治療B細(xì)胞淋巴瘤和白血病的靶點(diǎn)之一，而基于此靶點(diǎn)成功開發(fā)的抗體藥物也有很多。

國(guó)內(nèi)外CD20 CAR-T療法的研究進(jìn)展

國(guó)內(nèi)

如上圖所示，CD20 CAR-T療法在我國(guó)開展臨床試驗(yàn)的數(shù)量處于國(guó)際領(lǐng)先。

早在2012年底，中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院分子免疫室/生物治療病區(qū)在國(guó)際上開展了以CD20為靶點(diǎn)的CAR-T細(xì)胞治療復(fù)發(fā)難治性彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)的臨床試驗(yàn)研究，于2014年完成并首次報(bào)道了7例患者的I期臨床研究結(jié)果，顯示CD20 CAR-T細(xì)胞聯(lián)合減瘤預(yù)處理方案能延長(zhǎng)腫瘤消退(Wang Y, et al. ClinImmunol. 2014)。同時(shí)，該團(tuán)隊(duì)也向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局申請(qǐng)了CD20 CAR-NKT專利(工程化CD20靶向性的NKT細(xì)胞及其制備方法和應(yīng)用，專利申請(qǐng)?zhí)枺?01410062069.7)。

2015年初，西比曼選擇與解放軍總醫(yī)院生命科學(xué)院分子免疫學(xué)研究室主任韓為東團(tuán)隊(duì)進(jìn)行戰(zhàn)略合作，借助自身在生物醫(yī)藥領(lǐng)域轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的成功經(jīng)驗(yàn)及充足研發(fā)資金優(yōu)勢(shì)，協(xié)助韓為東教授開展以CD20為代表的具有知識(shí)產(chǎn)權(quán)的CAR-T創(chuàng)新藥物的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究。

在I期臨床研究基礎(chǔ)上，韓為東團(tuán)隊(duì)開展了CD20 CAR-T治療復(fù)發(fā)難治性NHL的IIa期臨床研究，11例入組患者的相關(guān)研究結(jié)果于2016年10月在《Signal Transduction and Targeted Therapy》雜志報(bào)道。11例患者中6例在CAR-T輸注后評(píng)價(jià)為CR(其中1例為由1期轉(zhuǎn)入IIa期繼續(xù)行CD20 CAR-T單獨(dú)治療的患者)，3例PR，2例疾病穩(wěn)定(SD)，其中2例患者(1例PR, 1例SD)在后期經(jīng)過(guò)局部放療后也獲得了CR。

2017年10月初，韓為東團(tuán)隊(duì)再次在《Signal Transduction and Targeted Therapy》雜志發(fā)表了研究報(bào)告。文章在對(duì)受試后可評(píng)價(jià)的16例患者的臨床轉(zhuǎn)歸進(jìn)行回顧總結(jié)的基礎(chǔ)上，重點(diǎn)指出：8例患者在CAR-T輸注(或者聯(lián)合局部放療)達(dá)到CR后，除3例在6月左右再次復(fù)發(fā)外，截止2017年7月底，仍有5例患者處于持續(xù)CR狀態(tài)(1例來(lái)自I期受試者，4例來(lái)自IIa期受試者)，其中1例患者張某持續(xù)CR期已經(jīng)達(dá)到57月，3例超過(guò)40個(gè)月，1例超過(guò)20個(gè)月。與之同期，2017年7月美國(guó)NCI機(jī)構(gòu)在《Molecular Therapy》報(bào)道了以CD19-CAR-T治療NHL的長(zhǎng)期隨訪結(jié)果，顯示7例患者中5例CR，其中4例患者的持續(xù)CR期分別為56、51、44、38個(gè)月。

這兩項(xiàng)研究表明CAR-T治療不僅可以使得復(fù)發(fā)難治性NHL患者獲得短期療效，對(duì)于多數(shù)CAR-T后獲得CR的患者還可以獲得長(zhǎng)期的CR療效。同時(shí)也表明針對(duì)CD20的CAR-T治療在復(fù)發(fā)難治性NHL患者中的長(zhǎng)期有效性。

長(zhǎng)期安全性方面，韓為東團(tuán)隊(duì)也觀察到CAR-T治療后持續(xù)CR的患者往往伴隨有較為長(zhǎng)期的B細(xì)胞缺乏或者低下，以及低的免疫球蛋白血癥。5例長(zhǎng)期CR患者中，除1例患者在CAR-T治療后7月出現(xiàn)3級(jí)的帶狀皰疹感染外，其余患者均可以通過(guò)丙種球蛋白的定期補(bǔ)充有效預(yù)防3級(jí)以上的感染性疾病發(fā)生。

上海隆耀生物科技有限公司與徐州醫(yī)科大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院合作，正在開展針對(duì)復(fù)發(fā)性或難治性B細(xì)胞惡性腫瘤的CD19 CAR-T和CD20-CAR T細(xì)胞的聯(lián)合移植研究。研究團(tuán)隊(duì)認(rèn)為，雖然兩種單靶治療方法均可誘導(dǎo)B細(xì)胞淋巴瘤消退，仍存在癌細(xì)胞逃逸和腫瘤復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。目前尚無(wú)關(guān)于兩種單一靶向療法聯(lián)合移植的報(bào)道。該研究著重于評(píng)價(jià)安全性和療效，以及聯(lián)合移植是否可以降低復(fù)發(fā)率。

國(guó)外

2017年9月，頂級(jí)癌癥中心Fred Hutch將其開發(fā)的一款CD20 CAR-T療法授權(quán)給了Mustang Bio公司，以期盡快轉(zhuǎn)化到臨床上去。

Mustang Bio提供部分支持的I/II期臨床試驗(yàn)將由Fred Hutch的臨床研究部的Mazyar Shadman博士領(lǐng)導(dǎo)。試驗(yàn)將招募約30例復(fù)發(fā)或難治性B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤患者(B-NHL)，符合條件的患者將首先進(jìn)行活組織檢查以確保他們的腫瘤上有CD20標(biāo)記。研究人員表示，希望正如臨床前研究中所表明的那樣，CD20 CAR-T療法甚至能夠比CD19 CAR-T效果更好。