從細(xì)菌細(xì)胞中分離質(zhì)粒DNA的自動化
從細(xì)菌中分離質(zhì)粒DNA是一種重要的分子生物學(xué)方法,用于產(chǎn)生用于優(yōu)選下游反應(yīng)的模板DNA。質(zhì)粒分離方法是基本的; 然而,高通量質(zhì)粒DNA提取一直具有挑戰(zhàn)性,存在諸如低產(chǎn)量和基因組DNA(gDNA)污染的問題。
一種自動化,高通量,基于多孔的質(zhì)粒提取技術(shù),其產(chǎn)量適合下游應(yīng)用且不含gDNA,將大大有利于高通量實(shí)驗(yàn)室,其中質(zhì)粒提取經(jīng)常成為瓶頸。
96孔二氧化硅過濾板質(zhì)粒提取試劑盒可在市場上買到。在這些方法中,收獲細(xì)菌細(xì)胞并通過堿裂解裂解,消除細(xì)胞碎片,然后通過結(jié)合二氧化硅膜收集提取的DNA。隨后在洗脫純化的DNA之前洗滌膜。
在本文中,耶拿描述了在SynbiCITE倫敦DNA鑄造開發(fā)出一種技術(shù),它使用CyBio ® FELIX移液平臺自動96孔,二氧化硅過濾板基于質(zhì)粒DNA提取協(xié)議。
使用的CyBio ® FELIX移液平臺(圖1)使96個(gè)樣品,以在同一時(shí)間進(jìn)行處理,在約1.5小時(shí),用通用性同時(shí)處理大量的板。緊湊的平臺最大限度地減少了實(shí)驗(yàn)室中自動質(zhì)粒分離系統(tǒng)所需的工作臺空間,并且與臺式離心機(jī)和機(jī)械臂一起,可以實(shí)現(xiàn)完全自動化的質(zhì)粒提取系統(tǒng)。使用該技術(shù),從細(xì)菌培養(yǎng)物中分離出平均產(chǎn)量為65ng /μL的質(zhì)粒DNA,樣品之間的變異性較低(±7.7ng /μLSD)和50μL的洗脫體積。質(zhì)粒DNA樣品也具有高質(zhì)量,適用于下游應(yīng)用,如轉(zhuǎn)化或測序。
推薦內(nèi)容
-
心理知識:小孩經(jīng)常生氣的危害大嗎
隨著社會壓力的不斷加大,人們現(xiàn)在把越來越多的目光放到了一個(gè)人的心理情況上。確實(shí),每個(gè)人的抗壓指數(shù)是有限的,一個(gè)平時(shí)看著正常的人...
-
離婚的忠告有哪些
生活中,不管我們在跟自己獨(dú)處還是跟別人相處的過程中其實(shí)我們會發(fā)現(xiàn)心理對一個(gè)人的影響是很大的。因此當(dāng)我們發(fā)現(xiàn)自己有心理疾病的傾向...
-
骨質(zhì)疏松癥的脊柱手術(shù)對于緩解疼痛沒有比注射更好
BMJ今天發(fā)表的一項(xiàng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),老年骨質(zhì)疏松癥患者的椎體成形術(shù)(修復(fù)脊柱骨折的手術(shù))對于緩解疼痛并不比假(安慰劑)手術(shù)更有效。研究人員稱他
-
研究人員開發(fā)出針對全球作物害蟲的首個(gè)基因驅(qū)動
加利福尼亞大學(xué)圣地亞哥分校的生物學(xué)家已經(jīng)開發(fā)出一種操縱農(nóng)業(yè)害蟲基因的方法,這種基因已經(jīng)侵入美國大部分地區(qū)并對高價(jià)值的漿果和其他...
-
人為什么愛說閑話
現(xiàn)在的人們越來越物質(zhì)化了,什么都要攀比,其實(shí)生活是自己的,過得開不開心只有自己知道。有時(shí)候我們真的不需要在意別人的眼光,做自己...
-
心理知識:為什么老人喜歡看報(bào)紙
現(xiàn)實(shí)生活中,我們很難揣測出一個(gè)人的心理活動。但是我們可以根據(jù)一些知識的細(xì)節(jié),去假設(shè)判斷一些人的心理,也包括對自己的心理的認(rèn)知。...
-
醫(yī)生,我經(jīng)常頭痛,會腦梗死嗎?你懂嗎?
互聯(lián)網(wǎng)時(shí)代,每個(gè)人都是信息傳播者,但是我們必須清楚一點(diǎn):在沒有獲得真正證實(shí)的消息之前,千萬不能隨意散播謠言,很容易造成以訛傳訛...
-
心理知識:“惡搞”畢業(yè)照是什么心理
心理活動是每個(gè)人都有的。然而這樣一個(gè)別人不知道的思想角落,往往容易被他人忽視。所以我們自身必須時(shí)刻關(guān)注自己的內(nèi)心需求,不能讓自...
-
葡萄皮上長“刺”能放心吃嗎?你知道哪些
隨著互聯(lián)網(wǎng)的快速發(fā)展,我們在獲取信息的時(shí)候很容易被帶跑方向。有時(shí)候真相也許并不是網(wǎng)上說的那樣,所以我們必須要有自己的判斷和獨(dú)立...
-
蝦和水果同食產(chǎn)生砒霜?很多人想問
面對流言,希望我們第一時(shí)間想到的是尋找官方回應(yīng)。而不是著急著把流言傳播出去,畢竟現(xiàn)在網(wǎng)絡(luò)相關(guān)的法律法規(guī)都出臺了,網(wǎng)絡(luò)上傳播謠言...