丙型病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)（WS213-2008）

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了丙型病毒性肝炎的診斷依據(jù)、診斷原則、診斷

和鑒別診斷。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于全國各級各類醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)及其工作人員對

丙型病毒性肝炎的診斷、報告。

2縮略語

HCV:丙型病毒性肝炎病毒

抗-HCV：抗丙型病毒性肝炎病毒抗體

HCVRNA:丙型病毒性肝炎病毒核糖核酸

RT-PCR:逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)

:酶聯(lián)免疫吸附試驗

EIA:酶免疫檢測

ALT:丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶

AST:門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶

B超：腹部超聲顯像

CT:計算機(jī)斷層掃描

MRI:磁共振成像

3診斷依據(jù)

3.1流行病學(xué)史

3.1.1曾接受過血液、血液制品或其他組織、細(xì)胞成分

治療，或器官移植。

3.1.2有血液透析史、不潔注射史，或其他消毒不嚴(yán)格的有

創(chuàng)檢查、治療史，有靜脈注射史。

3.1.3職業(yè)供血者，特別是接受過成分血單采回輸者。

3.1.4與HCV感染者有性接觸史，或HCV感染者（母親）所

生的嬰兒。

3.2臨床表現(xiàn)

3.2.1急性丙型病毒性肝炎

3.2.1.1病程在6個月以內(nèi)，全身乏力、食欲減退、惡心和

右季肋部疼痛或不適等。

3.2.1.2可有輕度肝腫大、部分患者可出現(xiàn)脾腫大；少數(shù)患

者可伴低熱或出現(xiàn)黃疽。

3.2.1.3部分患者可有關(guān)節(jié)疼痛等肝外表現(xiàn)。

3.2.1.4部分患者可無明顯癥狀和體征。

3.2.2慢性丙型病毒性肝炎

3.2.2.1病程超過6個月，全身乏力、食欲減退、惡心和右

季肋部疼痛或不適等。

3.2.2.2部分患者可有肝病面容、肝掌、蜘蛛痣及輕度肝、

脾腫大。

3.2.2.3部分患者可無明顯癥狀和體征。

3.2.3丙型病毒性肝炎肝硬化

3.2.3.1可有全身乏力、食欲減退、惡心和右季肋部疼痛或

不適等。

3.2.3.2可有肝病面容、肝掌、蜘蛛痣及腹壁或食管、胃底

靜脈曲張及脾臟腫大和脾功能亢進(jìn)。

3.2.3.3失代償期患者可有腹水、肝性腦病及消化道出血史。

3.3實驗室檢查

3.3.1急性丙型病毒性肝炎有血清ALT、AST升高，部分病例

可有血清膽紅素升高。部分慢性丙型病毒性肝炎和丙型病毒

性肝炎肝硬化患者亦可有ALT、AST升高。

3.3.2血清抗-HCV陽性。

3.3.3血清HCVRNA陽性。

3.4組織病理學(xué)檢查

3.4.1急性丙型病毒性肝炎

可有小葉內(nèi)及匯管區(qū)炎癥等多種病變，其組織學(xué)特征包括：

a)單核細(xì)胞增多癥樣病變，即單個核細(xì)胞浸潤于肝竇中，

形成串珠狀；

b)肝細(xì)胞大泡性脂肪變性；

c)膽管損傷伴匯管區(qū)大量淋巴細(xì)胞浸潤，甚至有淋巴濾泡

形成；

d)常見界面性炎癥。

3.4.2慢性丙型病毒性肝炎

肝組織中常可觀察到不同程度的界面炎、匯管區(qū)淋巴浸潤

甚至淋巴濾泡形成、膽管損傷及不同程度的纖維化，小葉內(nèi)

肝細(xì)胞脂肪變性、庫普弗細(xì)胞或淋巴細(xì)胞聚集。

3.4.3慢性丙型病毒性肝炎肝硬化

在慢性丙型病毒性肝炎病理改變的基礎(chǔ)上出現(xiàn)肝纖維化及

小葉結(jié)構(gòu)的改變，即假小葉形成。

3.5影像學(xué)檢查

3.5.1急性丙型病毒性肝炎

B超、CT或MRI可顯示肝脾輕度腫大。

3.5.2慢性丙型病毒性肝炎

B超、CT或MRI顯示肝實質(zhì)不均勻．可見肝臟或脾臟輕度

增大。

3.5.3丙型病毒性肝炎肝硬化

B超、CT或MRI可顯示肝臟邊緣不光滑甚至呈鋸齒狀、肝

實質(zhì)不均勻甚至呈結(jié)節(jié)狀，門靜脈增寬，脾臟增大。

4診斷原則

依據(jù)流行病學(xué)資料、癥狀、體征和肝功能試驗結(jié)果進(jìn)行初

步診斷，確診丙型病毒性肝炎須依據(jù)HCVRNA檢測。區(qū)分急

性、慢性丙型病毒性肝炎及丙型病毒性肝炎肝硬化須根據(jù)明

確的暴露時間、影像學(xué)及組織病理學(xué)檢查結(jié)果。

5診斷

5.1疑似丙肝病例

符合下列任何一項可診斷：

5.1.1符合3.1和3.2。

5.1.2符合3.1和3.3.1。

5.2臨床診斷丙肝病例

符合下列任何一項可診斷：

5.2.1符合3.3.2和3.1。

5.2.2符合3.3.2和3.2。

5.2.3符合3.3.2和3.3.1。

5.3確診丙肝病例

疑似病例或臨床診斷病例和3.3.3。

5.3.1急性丙肝診斷

符合下列任何一項可診斷：

5.3.1.1符合3.3.3和3.2.1。

5.3.1.2符合3.3.3和3.4.1。

5.3.2慢性丙肝診斷

符合下列任何一項可診斷：

5.3.2.1符合3.3.3和3.2.2。

5.3.2.2符合3.3.3和3.4.2。

5.3.2.3符合3.3.3和3.5.2。

5.3.3丙肝肝硬化

符合下列任何一項可診斷：

5.3.3.1符合3.3.3和3.2.3。

5.3.3.2符合3.3.3和3.4.3。

5.3.3.3符合3.3.3和3.5.3。

6鑒別診斷

6.1其他病毒性肝炎

其他病毒性肝炎臨床表現(xiàn)和肝功能檢查結(jié)果可以和丙型病

毒性肝炎相似，鑒別診斷主要依靠相應(yīng)的血清學(xué)和（或）病

毒學(xué)檢查陽性，而抗-HCV陰性、特別是HCVRNA陰性。

6.2丙型肝炎病毒感染后已被清除

HCV感染后自行恢復(fù)或經(jīng)治療后病毒已清除者，抗-HCV可

以長時間陽性，但反復(fù)檢測HCVRNA均應(yīng)為陰性。

6.3自身免疫性疾病伴抗-HCV陽性

一些自身免疫性疾病患者也可出現(xiàn)抗-HCV陽性，但通常有

多種自身抗體陽性，而HCVRNA始終陰性，可以與丙型病毒

性肝炎鑒別。

6.4母嬰抗-HCV被動傳輸

母體的IgG型抗-HCV可以通過胎盤進(jìn)入到胎兒體內(nèi)，因

此6個月以內(nèi)的嬰兒抗HCV陽性并不一定代表HCV感染。應(yīng)

以嬰兒HCVRNA陽性（出生2個月以后）作為其HCV感染的

依據(jù)。

WS213——2008

附

(規(guī)范性附錄)

丙型病毒性肝炎病毒抗體(抗-HCV)的檢測目前常用的抗—

HCV檢測試劑盒為第三代，含有NS4抗原(c100-3)、核心抗

原(c22)、NS3抗原(c33)和NS5抗原，其靈敏度和特異度均

更高。常用方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法或其他酶免

疫分析法(EIA)。應(yīng)采用國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的診

斷試劑盒。

A．1基本原理

本方法采用基因工程重組或人工合成的丙型病毒性肝炎病

毒抗原肽片段包被聚苯乙烯珠或板，以辣根過氧化物酶、堿

性磷酸酶或化學(xué)發(fā)光物標(biāo)記的羊或鼠抗人IgG抗體為示蹤物，

EIA方法檢測人血清中的IgG型丙肝病毒抗體。

A.2試劑由試劑盒提供。

A．3步驟

錄A

具體操作步驟和結(jié)果判定應(yīng)嚴(yán)格依據(jù)各試劑盒的說明書進(jìn)

行，尤其是應(yīng)按照說明書的要求設(shè)置陰性和陽性對照，并按

說明書提供的方法判斷結(jié)果。最好有質(zhì)控血清。

WS213——2008

附錄B

(規(guī)范性附錄)

丙型病毒性肝炎病毒核糖核酸(HCVRNA)的檢測方法

B．1丙型病毒性肝炎病毒核糖核酸(HCVRNA)定性檢測：

逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)

B．1．1原理

純化的HCVRNA在逆轉(zhuǎn)錄酶催化下合成cDNA；再以此DNA為模板，

加上引物和dNTP，在耐熱DNA聚合酶(Taq酶)催化下合成與原DNA鏈

完全互補(bǔ)的DNA鏈，從而實現(xiàn)DNA倍增。定性分析的最低檢測限較低

(即靈敏度相對較高)，主要用于確定丙型病毒性肝炎的診斷。

B．1．2試劑

B．1．2．1引物：引物通常由HCV基因保守區(qū)5’非編碼區(qū)(5'NCR)

的15～26個堿基組成，注意引物中核苷酸不要自身產(chǎn)生互補(bǔ)。

B．1．2．2dNTP：包括dATP、dGTP、dCTP、dTTP，使用pH為8．3。

B．1．2．3逆轉(zhuǎn)錄酶和耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)。

B．1．2．4陰性和陽性對照品

B．1．3操作步驟

各廠家生產(chǎn)的PCR藥盒均有詳細(xì)的使用方法介紹，應(yīng)嚴(yán)格按說明書

的操作程序進(jìn)行，不可隨意。

B．2丙型病毒性肝炎病毒核糖核酸(1tCVRNA)定量檢測：實時熒光

定量多聚酶鏈反應(yīng)(FQ—PCR)實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反

應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，

最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。定量分析的最低

檢測限一般高于定性分析(即靈敏度相對較低)，主要用于決定是否開

始治療及考察治療效果。

B．2．1原理(以TagUan法為例)

PCR擴(kuò)增時，在加入一對引物的同時加人一個特異性的熒光探針，

該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團(tuán)和一個淬滅熒

光基團(tuán)。探針完整時，報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收；

PCR擴(kuò)增時，Taq酶的5，—3，外切酶活性將探針酶切降解，使報

告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信

號，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號

的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。，擴(kuò)增長度一般為50bp一100bp。

兩端的引物必須與cDNA鏈相同或互補(bǔ)，探針靠近一端引物。反應(yīng)時

(一般為42~C，30min)RNA先在反轉(zhuǎn)錄酶作用下逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，然后

在Taq聚合酶的作用下進(jìn)行指數(shù)擴(kuò)增。其操作過程包括95~C變性，

使雙鏈DNA分離，然后60~C迅速退火和延伸。

B．2．2熒光實時定量PCR儀

B．2．3試劑

B．2．3．1引物和探針：引物和探針通常由HCV基因保守區(qū)5’非

編碼區(qū)(5'NCR)的15～25個堿基組成，注意引物中核苷酸不要自身產(chǎn)

生互補(bǔ)和引物二聚體。

B．2．3．2dNTPs包括dATP、dGTP、dCTP、dTTP，pH8．3。

B．2．3．3反轉(zhuǎn)錄酶和耐熱DNA聚合酶。

B．2．3．4陽性參比晶(一般為10‘拷貝／mL～10’拷貝／mL)。

B．2．4操作步驟

各廠家生產(chǎn)的熒光定量PCR藥盒均有詳細(xì)的使用方法介紹，應(yīng)嚴(yán)格

按說明書的操作程序進(jìn)行，不可隨意改動。

WS213—2008

附錄C

（資料性附錄）

抗-HCV和HCVRNA檢測的臨床意義及HCVRNAPCR測定注意事項

C.1抗-HCV和HCVRNA檢測的臨床意義

C.1.1抗-HCV陽性，但反復(fù)檢測HCV和RNA均為陰性：可能

既往HCV感染已自行恢復(fù)，或經(jīng)治療病毒已清除；一些自身

免疫性疾病患者偶可出現(xiàn)抗-HCV陽性，但HCVRNA始終為陰

性。

C.1.2HCVRNA陽性，但抗-HCV陰性：可能為HCV感染早期，抗-HCV

尚未產(chǎn)生；處于嚴(yán)重免疫抑制狀態(tài)或免疫受損（如HIV感染），

或接受血液透析的患者，亦可在HCVRNA陽性的情況下呈抗-HCV

陰性。

C.1.3母體的IgG型抗-HCV可以通過胎盤進(jìn)入到胎兒體內(nèi)，

因此6個月以內(nèi)的嬰兒抗-HCV陽性并不一代表HCV感染。應(yīng)

以HCVRNA陽性作為HCV感染的依據(jù)。

C.2HCVRNAPCR測定注意事項

C.2.1嚴(yán)格按照行業(yè)行政主管部門頒發(fā)的有關(guān)基因擴(kuò)增實驗

室管理規(guī)范進(jìn)行工作。

C.2.2實驗室應(yīng)嚴(yán)格分為PCR前準(zhǔn)備區(qū)，樣本處理區(qū)和檢測

區(qū)。

C.2.3各區(qū)物品應(yīng)當(dāng)專用，以防交叉污染。

C.2.4使用的器皿和加樣器均應(yīng)專用，離心管、吸頭等均應(yīng)高壓滅茵。

C.2.5定期對實驗臺及各種實驗室用品進(jìn)行消毒。

C.2.6由于HCV為RNA病毒，在血清采集、分離、保存及RNA

提取過程中應(yīng)特別注意防止RNA酶對RNA的降解作用。

C.2.7特別要注意應(yīng)在無茵條件下采血，并在4h內(nèi)將血清凍

存在-30℃以下。

C.2.8必須正確設(shè)置陰性和陽性對照。