·３９９·

第１９卷第５期

２００６年５月

醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報

Ｊｏｕｒｎａｌ?。铮妗。停澹洌椋悖幔臁。校铮螅簦纾颍幔洌酰幔簦澹?/p>

Ｖｏｌ．?。保埂。危铮。?/p>

Ｍａｙ．?。玻埃埃?/p>

·論著·

新生兒臍帶血Ｔ細(xì)胞亞的流式細(xì)胞儀檢測

劉清泉，，黃長形‘，樊春澎，李怡，

（Ｉ．第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院解放軍感染病診療中心，陜西西安７１００３８；?。玻谒能娽t(yī)大學(xué)西京醫(yī)院

臨床免疫科，陜西西安７１００３２；?。常谒能娽t(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院婦產(chǎn)科，陜西西安７１００３８）

摘要：目的：檢測我國新生兒臍帶血Ｔ細(xì)胞亞的變化。方法：使用全自動血液進(jìn)行血常規(guī)檢測；熒光

素標(biāo)記的抗ＣＤ４／抗ＣＤ８／抗ＣＤ３和抗ＣＤ４／抗ＣＤ２５／抗ＣＤ３單克隆抗體對血液細(xì)胞表面分子進(jìn)行免疫熒光染，

用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行各細(xì)胞亞計數(shù)和分析。結(jié)果：新生兒臍帶血中紅細(xì)胞（ＲＢＣ）計數(shù)、血紅蛋白（Ｈｂ）含量、白

細(xì)胞（ＷＢＣ　）計數(shù)、淋巴細(xì)胞百分比與外周血有顯著性差異。新生兒臍帶血組中ＣＤ３?。唷。约?xì)胞、ＣＤ３＇?。茫模矗А。约?xì)

胞、ＣＤ３＇?。茫模甘约?xì)胞、ＣＤ４＇?。茫模福А。约?xì)胞、ＣＤ４十ＣＤ２５?。瑁椋纾枵{(diào)節(jié)性Ｔ細(xì)胞、ＣＤ４＇　ＣＤ２５＇＂＇?。约?xì)胞、ＣＤ４＇　ＣＤ２５一Ｔ細(xì)胞絕

對計數(shù)及其在各自細(xì)胞亞中的百分比均存在顯著性差異。結(jié)論：中國正常新生兒臍帶血與外周血的

ＲＢＣ，Ｈｂ，ＷＢＣ及Ｔ細(xì)胞亞檢測結(jié)果存在顯著性差異，這與新生兒免疫機(jī)制發(fā)育不完全是相符合的。

關(guān)鍵詞：Ｔ細(xì)胞亞；新生兒臍帶血；外周血；流式細(xì)胞術(shù)

中圖分類號：８３３１．１文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ文章編號：１００８－８１９９（２００６）０５－０３９９－０３

Ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃ?。悖瑁幔颍幔悖簦澹颍椋幔簦椋铮睢。铮妗。瑁酰恚幔睢。酰恚猓椋欤椋悖幔臁。悖铮颍洹。猓欤铮铮洹。浴。欤恚穑瑁铮悖簦濉。螅酰猓穑铮穑酰欤幔簦椋铮睿?/p>

ＬＩ　　　　　　　　　　　　　?。铡。眩椋睿纾瘢酰幔睿?，ＨＵＡＮＧ?。茫瑁幔睿纾椋睿纾?，ＦＡＮ?。茫瑁酰睿恚澹椋?，ＬＩ?。伲椋?/p>

（１．?。模椋幔纾睿铮螅椋螅Γ裕颍澹幔簦恚澹睿簟。茫澹睿簦澹颉。铮妗。桑睿妫澹悖簦椋铮酰蟆。模椋螅澹幔螅澹蟆。铮妗。校蹋粒裕幔睿纾洌酢。龋铮螅穑椋簦幔?，?。簦瑁濉。疲铮酰颍簦琛。停椋欤椋簦幔颍。停澹洌椋?/p>

ｃａｌ?。眨睿椋觯澹颍螅椋簦?，?。兀椤幔睢。罚保埃埃常?，Ｓｈａｎｎｘｉ，Ｃｈｉｎａ；２．?。仄梗睿纭。龋铮螅穑椋簦幔?，ｔｈｅ?。疲铮酰颍簦琛。停椋欤椋簦幔颍。停澹洌椋悖幔臁。眨睿椋觯澹颍螅椋簦?，

Ｘｉ’ａｎ?。罚保埃埃常?，Ｓｈａｎｎｘｉ，Ｃｈｉｎａ；３．　Ｔａｎｇｄｕ?。龋铮螅穑椋簦幔?，ｔｈｅ?。疲铮酰颍簦琛。停椋欤椋簦幔颍。停澹洌椋悖幔臁。眨睿椋觯澹颍螅椋簦?，　Ｘｉ’ａｎ

７１００３８　，　Ｓｈａｎｎｘｉ，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ?。螅簦酰洌。簦瑁濉。螅椋簦酰幔簦椋铮睢。铮妗。浴。悖澹欤臁。螅酰猓穑铮穑酰欤幔簦椋铮睿蟆。椋睢。瑁酰恚幔睢。酰恚猓椋欤椋悖幔臁。悖铮颍洹。幔睿洹。幔洌酰欤?/p>

ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ?。猓欤铮铮洌　　。停澹簦瑁铮洌螅海疲酰欤臁。猓欤铮铮洹。洌椋妫妫澹颍澹睿簦椋幔臁。悖铮酰睿簦蟆。鳎澹颍濉。洌澹簦澹颍恚椋睿澹洹。猓。猓欤铮铮洹。颍铮酰簦椋睿濉。澹幔恚椋睿幔?/p>

ｔｉｏｎ．?。樱簦幔椋睢。簦瑁濉。猓欤铮铮洹。悖澹欤欤蟆。鳎椋簦琛。欤妫酰铮颍澹螅悖澹睿簟。欤幔猓澹欤澹洹。幔睿簦椋茫模矗。幔睿簦椋茫模玻担。幔睿簦椋茫模场。幔睿洹。幔睿簦椋茫模矗。幔睿簦椋?/p>

ＣＤ８／?。幔睿簦椋茫模场。恚铮睿铮悖欤铮睿幔臁。幔睿簦椋猓铮洌。樱幔恚穑欤澹蟆。鳎澹颍濉。颍酰睢。幔睿洹。幔睿幔欤澹洹。妫铮颉。簦瑁颍澹澹悖铮欤铮颉。椋恚恚酰睿铮妫欤酰铮颍澹螅悖澹睿悖?/p>

ｂｙ?。欤妫铮鳌。悖簦铮恚澹簦颍　。遥澹螅酰欤簦螅海裕瑁濉。悖铮睿簦澹睿簦蟆。铮妗。澹颍簦瑁颍铮悖簦澹蟆?，ｌｅｕｃｏｃｙｔｅｓ，ｈａｅｍａｔｏｇｌｏｂｉｎ?。幔睿洹。簦瑁濉。穑澹颍悖澹睿簦幔纾?/p>

ｏｆ　ｌｙｍｐｈｏｌｅｕｋｏｃｙｔｅ?。椋睢。酰恚猓椋欤椋悖幔臁。悖铮颍洹。猓欤铮铮洹。鳎澹颍濉。恚幔颍耄澹洌欤。洌椋妫妫澹颍澹洹。妫颍铮怼。簦瑁铮螅濉。椋睢。幔洌酰欤簟。穑澹颍椋穑瑁澹颍幔臁。猓欤铮铮洌?/p>

Ｔｈｅ　ａｂｓｏｌｕｔｅ?。悖铮酰睿簟。幔睿洹。簦瑁濉。穑澹颍悖澹睿簦幔纾濉。铮妗。茫模常浴。悖澹欤欤?、ＣＤ３＋ＣＤ４＋Ｔ?。悖澹欤欤?、ＣＤ３十ＣＤ８＋Ｔ?。悖澹欤欤蟆ⅲ茫模矗?/p>

ＣＤ８＋Ｔ?。悖澹欤欤蟆ⅲ茫模矗茫模玻担ⅲⅰ。颍澹纾酰欤幔簦铮。颍裕恪。澹欤欤?、ＣＤ４‘ＣＤ２５＇０｀　Ｔ　ｃｅｌｌｓ?。幔睿洹。茫模矗茫模玻狄唬浴。悖澹欤欤蟆。鳎澹颍?/p>

ｍａｒｋｅｄｌｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｄ?。妫颍铮怼。簦瑁铮螅濉。椋睢。幔洌酰欤簟。穑澹颍椋穑瑁澹颍幔臁。猓欤铮铮洌　　。茫铮睿悖欤酰螅椋铮睿海裕瑁濉。妫酰欤臁。猓欤铮铮洹。洌椋妫妫澹颍澹睿簦椋幔臁。悖铮酰睿簦?/p>

ａｎｄ?。簦瑁濉。浴。悖澹欤臁。螅酰猓穑铮穑酰欤幔簦椋铮睿蟆。椋睢。悖铮颍洹。鳎澹颍濉。恚幔颍耄澹洌欤。洌椋妫妫澹颍澹洹。妫颍铮怼。簦瑁铮螅濉。椋睢。幔洌酰欤簟。穑澹颍椋穑瑁澹颍幔臁。猓欤铮铮洌。裕瑁椋?/p>

收稿日期：２００６－０１－２４；修訂日期：２００６－０２－２７

基金項目：教育部歸國人員啟動基金資助項目（批準(zhǔn)號：２００２－ＨＧＯ０３）；第四軍醫(yī)大學(xué)人才基金資助項目（２００３年度）；第四軍醫(yī)大

作者簡介

通訊作者

學(xué)唐都醫(yī)院苗子人才基金資助項目（２００１年度）　　

主治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士研究生，從事傳染病專業(yè)。

劉清泉（１９７６－），男，山東滕州人

，

副教授，副主任醫(yī)師，醫(yī)學(xué)博士，碩士生導(dǎo)師，從事傳染病專業(yè)。

黃長形（１９６５一），男，安徽望江人

，

·４００·醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報

２００６年５月第１９卷

ｒｅｓｕｌｔ?。椋蟆。穑颍铮猓幔猓欤。悖铮颍颍澹螅穑铮睿洌椋睿纭。鳎椋簦琛。簦瑁濉。椋恚恚酰睿濉。螅簦幔簦濉。铮妗。簦瑁濉。睿澹铮睿幔簦澹螅?/p>

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｔ?。悖澹欤臁。螅酰猓穑铮穑酰欤幔簦椋铮睿螅唬龋酰恚幔睢。酰恚猓椋欤椋悖幔臁。悖铮颍洹。猓欤铮铮?；Ａｄｕｌｔ?。穑澹颍椋穑瑁澹颍幔臁。猓欤铮铮?；Ｆｌｏｗ

ｃｙｔ　　　　　　　　　　　　　　　?。铮恚澹簦?/p>

０引言

ＰＥ一抗ＣＤ２５?。恚粒夂停校澹颍茫幸豢梗茫模场。恚粒饨M合（各２０

特異性免疫功能低下是乙型病毒性肝炎慢性化　　　　

的關(guān)鍵［’，’〕。妊娠期、兒童期催患感染乙型病毒性

閃）染，另設(shè)１管為ＦＩＴＣ一抗ＣＤ４?。恚粒?，ＰＥ一抗ＫＬＨ

ｍＡｂ同型對照和ＰｅｒＣＰ一抗ＣＤ３　ｍＡｂ（各２０?。?，１）。加　

１００閃抗凝血室溫避光孵育１５?。恚椋睢＜蛹t細(xì)胞裂解

肝炎其慢性化機(jī)率明顯高于成年感染者〔’川，這與

新生兒及兒童免疫系統(tǒng)發(fā)育程度低于有關(guān)。我

們用流式細(xì)胞儀對外周血和新生兒臍帶血Ｔ

細(xì)胞亞進(jìn)行了檢測分析，希望能對新生兒的免疫

狀態(tài)有一個比較全面地了解。

１材料和方法

１．１研究對象新生兒臍帶血來自本院婦產(chǎn)科

２００５年４－６月收治的足月自然分娩健康新生兒１１

例（男嬰５例，女嬰６例），結(jié)扎剪斷臍帶后臍靜脈

采血。外周血采自我院健康工作人員１１例

（男６例，女５例，年齡２３一３５歲）。３０　ｍｉｎ內(nèi)血細(xì)

胞計數(shù)，２ｈ內(nèi)流式細(xì)胞術(shù)檢測。

１．２儀器和試劑Ｓｙｓｍｅｘ?。兀拧。。病。保埃叭詣友?/p>

及試劑購自日本Ｓｙｓｍｅｘ（希森美康）株式會

社。以下儀器和試劑購自Ｂｅｃｔｏｎ?。模椋悖耄椋睿螅铮罟荆毫?/p>

式細(xì)胞儀（ＦＡＣＳ　Ｃａｌｉｂｕｒ）　，５?。恚臁。牛模裕粒耍鼓?、絕

對計數(shù)ＴｒｕＣＯＵＮＴ管、ＲＢＣ裂解液、ＦＩＴＣ／ＰＥ／ＰｅｒＣＰ

標(biāo)記抗ＣＤ４／抗ＣＤ８／抗ＣＤ３?。恚粒饷庀矗裕颍椋裕牛樱栽?/p>

劑（ＳＫ３，ＳＫＩ　，ＳＫ７克?。?、ＦＩＴＣ一抗ＣＤ４?。恚粒猓ㄊ?/p>

ＩｇＧＩ　，?。樱耍晨寺。?，ＰＥ一抗ＣＤ２５　ｍＡｂ（鼠ＩｇＧｌ，２Ａ３克

隆）、ＰｅｒＣＰ一抗ＣＤ３　ｍＡｂ（鼠ＩｇＧ１，ＳＫ７克隆）及相應(yīng)

鼠抗鑰孔戚血藍(lán)素（ＫＬＨ）?。恚粒馔蛯φ眨ǎ停铮酰螅?/p>

似；ｘ４０克?。?。自行配制洗滌液和固定液：洗滌液

（ＮａＣｌ　８．?。啊。纾耍茫臁。埃。病。?，　Ｎａｔ?。龋校埃础。保保担?，ＫＨｚ　Ｐ０４

０．?。病。?，　ＮａＮ３?。保。啊。?，　Ｈ２?。啊。保埃埃啊。恚欤。。埃。矗怠。簦?，ｍ濾膜過濾

除菌；固定液（ＮａＣｌ?。福。啊。纾。耍茫臁。埃。病。纾。危幔簟。龋校?，?。保。保?/p>

ｇ，?。耍龋玻校埃础。埃。病。纾嗑奂兹保啊。纾。龋玻啊。保埃埃啊。恚欤?，　０．?。玻?/p>

｝ｔ，ｍ濾膜過濾除菌。

１．３血細(xì)胞計數(shù)使用Ｓｙｓｍｅｘ　ＸＥ?。。玻保埃叭詣?/p>

血細(xì)胞儀及試劑進(jìn)行血細(xì)胞分類計數(shù)。

１．４　　ＣＤ４／ＣＤ８／ＣＤ３絕對計數(shù)２０?。穑笨梗茫模矗?/p>

ＣＤ８／抗ＣＤ３?。恚粒饷庀矗裕颍椋裕牛樱栽噭┘尤虢^對計數(shù)

ＴｒｕＣＯＵＮＴ管中，加５０?。鳎笨鼓覝乇芄夥跤保?/p>

ｍｉｎ，加紅細(xì)胞裂解液４５０?。遥煞跤保怠。恚椋?。流式細(xì)胞

儀（ＦＡＣＳ　Ｃａｌｉｂｕｒ）上ＭｕｌｔｉＳＥＴ軟件分析。

１．５　　ＣＤ４／ＣＤ２５／ＣＤ３染用ＦＩＴＣ一抗ＣＤ４?。恚粒猓?/p>

液２?。恚旆跤保啊。恚椋?，　３００?。。珉x心５?。恚椋?，棄上清。２?。恚?/p>

洗滌液洗滌１次，０．　５?。恚旃潭ㄒ汗潭ú腋〖?xì)胞。

流式細(xì)胞儀（ＦＡＣＳ?。茫幔欤椋猓酰颍┥希茫澹欤臁。眩酰澹螅糗浖治?。

１．６統(tǒng)計學(xué)方法ＳＰＳＳ?。保保。到y(tǒng)計軟件進(jìn)行描述

性統(tǒng)計分析，組間行ｔ檢驗。

２結(jié)果

２．１血細(xì)胞分類計數(shù)臍帶血中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、

粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞絕對計數(shù)和血紅蛋白含

量顯著高于外周血；血小板計數(shù)和單核細(xì)胞百

分比在兩組間無顯著性差異；淋巴細(xì)胞百分比高于

外周血，粒細(xì)胞百分比低于外周血，見

表１。

表１臍帶血與外周血血細(xì)胞分類計數(shù)比較（ｘ?。保樱?/p>

Ｔａｂｌｅ　１　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　?。粒酰簦铮恚幔簦椋澹洹。猓欤铮铮洹。悖澹欤臁。悖铮酰睿簟。铮妗。瑁酰恚幔睢。酰恚猓椋欤椋悖幔臁。悖铮颍?/p>

ｂｌ　　　　　　　?。铮铮洹。幔睿洹。幔洌酰欤簟。穑澹颍椋穑瑁澹颍幔臁。猓欤铮铮洌ā。。薄。蟆。?/p>

血細(xì)胞分類

外周血臍帶血

紅細(xì)胞（ｘ?。保埃保病。蹋矗矗叮贰。保埃常埃?/p>

５．　１０２?。保埃矗担病。?/p>

血紅蛋白（留Ｌ）１４０．２１８．９

１５５．４士６．８－　　

血小板（ｘ　１０’２／Ｌ）０．２３３?。保埃埃担?/p>

０．２５６士０．６３

白細(xì)胞（ｘ　１０９／Ｌ）５．８２９?。保保常埃?/p>

１３．８６４士３．?。福叮薄。。?/p>

粒細(xì)胞

（％）　　　?。担梗薄。保矗玻担常。浮。薄。保担贰。?/p>

（ｘ　　　　　１０９／Ｌ）３．５２５?。保埃福梗?/p>

７．３５４士３．?。常叮薄。?/p>

淋巴細(xì)胞

（％）　　　　３３．９士３．７

３８．５土１１．１＊

（ｘ　　　　?。保埃梗蹋保梗常彩浚埃常福?/p>

５．２６８?。薄。保。福担怠。?/p>

單核細(xì)胞

（％）　　　?。叮担保埃怠　。叮呈浚玻埂　?/p>

（ｘ　　　　?。保埃梗蹋埃常担妒浚埃埃梗?/p>

０．９０１士０．?。叮梗础。?/p>

與外周血比，＊Ｐ＜０．０５，＊＊?。小。迹埃。埃?/p>

２．２　?。约?xì)胞亞分析臍帶血ＣＤ３?。。约?xì)胞計數(shù)明

顯高于外周血；ＣＤ３?。。茫模词约?xì)胞計數(shù)及其占

ＣＤ３十Ｔ細(xì)胞比率明顯高于外周血；ＣＤ３＇?。茫模甘?/p>

Ｔ細(xì)胞計數(shù)明顯高于外周血，但其占ＣＤ３?。。约?xì)

胞比率低于外周血；ＣＤ４?。。茫模甘约?xì)胞計數(shù)明

顯高于外周血，而其占ＣＤ３十Ｔ細(xì)胞比率與

外周血無顯著性差異；；ＣＤ４＇／ＣＤ８＋比值明顯高于成

第５期劉清泉，等新生兒臍帶血Ｔ細(xì)胞亞的流式細(xì)胞儀檢測４０１

人外周血，見表２ａ

對臍帶血ＣＤ３　　　　?。。茫模词约?xì)胞表面ＣＤ２５分子進(jìn)

行流式細(xì)胞術(shù)分析時，依據(jù)ＣＤ２５表達(dá)強(qiáng)度可將

ＣＤ３＇?。茫模矗А。约?xì)胞分為三：ＣＤ４．?。茫模玻狄唬约?xì)胞、

ＣＤ４＇　ＣＤ２５＇＂｀　Ｔ細(xì)胞和ＣＤ４＇?。茫模玻担?，９ｈ調(diào)節(jié)性Ｔ細(xì)胞。

對外周血ＣＤ３＋ＣＤ４＋Ｔ細(xì)胞進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分

析時，則需以熒光強(qiáng)度１０’作為陰性界限，將熒光強(qiáng)

度＞１０２定為ＣＤ２５?。?，＂表達(dá)的標(biāo)準(zhǔn)［５，６］。臍帶血

ＣＤ４＋ＣＤ２５－Ｔ細(xì)胞計數(shù)及其占ＣＤ３?。。茫模础。。约?xì)胞

比率明顯高于外周血；ＣＤ４?。。茫模玻担Вⅲ唷。约?xì)胞計數(shù)

及其占ＣＤ３十ＣＤ４十Ｔ細(xì)胞比率明顯低于外周

血；ＣＤ４＋?。茫模玻担?；Ｋｈ調(diào)節(jié)性Ｔ細(xì)胞計數(shù)及其占

ＣＤ３十ＣＤ４＋Ｔ細(xì)胞比率明顯高于外周血，見

表２０

表２?。粤馨图?xì)胞亞的流式細(xì)胞儀分析（ｘ?。保樱?/p>

Ｔａｂｌｅ?。病　。疲茫汀。幔睿幔欤螅椋蟆。铮妗。浴。悖澹欤臁。螅酰猓穑铮穑酰欤幔簦椋铮睿螅ǎ浚螅?/p>

Ｔ細(xì)胞亞外周血臍帶血

ＣＤ３?。约?xì)胞絕對計數(shù)（個／國）１１７５．以１４１７．３０３０５７．９０１５０７．３１

ＣＤ３?。茫模础。约?xì)胞絕對計數(shù)（個／ＲＩ）６５０．　７３?。薄。保矗罚常玻玻保常保保埂。保常叮担。福叮?/p>

ＣＤ３?。。茫模础。约?xì)腳ＣＤ３?。约?xì)胞（任）５　　７．１０?。叮保?/p>

６９．　　臉１５．２１，

ＣＤ３?。茫模甘约?xì)胞絕對計數(shù)（個／ｗ１）４０９．５５?。薄。保埃保梗常福叮埃矗怠。保玻玻罚埃?/p>

ＣＤ３　＋?。茫模浮。约?xì)腳ＣＤ３　＋Ｔ細(xì)胞（％）３６．１　?。埃剑担矗?/p>

２７．　?。梗薄。保担矗?/p>

ＣＤ４十ＣＤ８十Ｔ細(xì)胞絕對計數(shù)（個／０）１１　　．如１５．０７３１　?。a－１３．　８５，

ＣＤ４＇　ＣＤ８十Ｔ細(xì)胞／ＣＤ３?。约?xì)胞（ｑｃ?。俊　。保埃保埃担?！　?。保福保埃矗?/p>

ＣＤ　＇ＣＤ２５一Ｔ細(xì)胞絕對計數(shù)（個／ｗ１）４０９．７３?。保埃担矗保保福保担帲保常担叮矗丁。?/p>

ＣＤ十ＣＤ２５一Ｔ細(xì)腳ＣＤ４＋?。约?xì)胞（％）６　　２．７５?。保叮福福浮　。甸啠保常福?/p>

ＣＤ４＇?。茫模玻担Вⅰ。约?xì)胞絕對計數(shù)（個／閃）２３３．３６?。保叮福福玻埂　。常矗担保担保梗?/p>

ＣＤ４十ＣＤ２５?。ⅲⅲ约?xì)胞／ＣＤ４＋?。约?xì)胞（“）３　　６．０８士７．０２４．　?。矗埂。保玻矗?/p>

ＣＤ４?。А。茫模玻怠。瑁В梗А。约?xì)胞絕對計數(shù)（個／ｗ１）９．　　０９士３．０５２２１．８２＋６７．偽率

ＣＤ４＇?。茫模玻怠。瑁В纾ⅰ。约?xì)腳ＣＤ４十Ｔ細(xì)胞（％）１．　?。矗埃保埃常?/p>

１０．５０１２．８０

ＣＤ４＋／（；ＤＳ十１．　　６１－０．２９２．６｛１０．７１

與外周血比，＊Ｐ＜０．０１

３討論

　　　　本試驗是為進(jìn)一步研究不同年齡乙型肝炎病毒

感染與慢性化發(fā)生率及慢性化與患者免疫狀態(tài)間相

互關(guān)系（結(jié)果尚未發(fā)表）而作的基礎(chǔ)性實驗。試驗

目的在于確定健康新生兒臍帶血及正常外周血

中白細(xì)胞及Ｔ細(xì)胞亞的實際情況，為進(jìn)一步評估

不同年齡乙型肝炎病毒感染者及不同肝炎狀態(tài)患者

免疫狀態(tài)做好準(zhǔn)備。

　　　　血細(xì)胞分類計數(shù)發(fā)現(xiàn)，新生兒臍帶血中血小板

計數(shù)與外周血比較無顯著性差異；新生兒臍帶

血中紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白含量、白細(xì)胞計數(shù)均明顯

高于正常外周血；雖然臍帶血中粒細(xì)胞絕對計

數(shù)明顯高于正常外周血，但其百分含量則相反，

說明臍帶血中含有更多的淋巴細(xì)胞。

進(jìn)一步分析臍帶血Ｔ細(xì)胞亞發(fā)現(xiàn)，　　　　臍帶血中

ＣＤ３＇?。约?xì)胞的數(shù)量明顯高于外周血，這與臍帶

血中白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞含量高于外周血有關(guān)。

ＣＤ３十ＣＤ４＋細(xì)胞為輔助性Ｔ細(xì)胞（Ｔｈ），包括ＴｈＯ，

Ｔｈｌ和Ｔｈ２亞ｔ７ｉ，臍帶血中其計數(shù)及占ＣＤ４＇?。约?xì)

胞比率明顯高于外周血。ＣＤ３十ＣＤ８十Ｔ細(xì)胞為

細(xì)胞毒性Ｔ淋巴細(xì)胞（ＣＴＬ或Ｔｃ?。?，包括Ｔｃｌ和Ｔｃ２

亞，雖然臍帶血中其計數(shù)明顯高于外周血，但

其占ＣＤ３＇　Ｔ細(xì)胞比率卻低于外周血。

ＣＤ４＇ＣＤ８＋細(xì)胞為不成熟Ｔ淋巴細(xì)胞，臍帶血中其

計數(shù)明顯高于外周血，而其占ＣＤ３　＇?。约?xì)胞比率

與外周血無顯著差異。臍帶血ＣＤ４＇／ＣＤ８＋比

值明顯高于外周血。

ＣＤ４＇　　　　　ＣＤ２５十調(diào)節(jié)性Ｔ細(xì)胞是細(xì)胞介導(dǎo)的免疫

抑制中的關(guān)鍵性細(xì)胞「８－１１１。外周血中，３５％的

ＣＤ４＇Ｔ細(xì)胞表達(dá)ＣＤ２５，但其中大部分表達(dá)中低水

平的ＣＤ２５，只有１％一３％表達(dá)高水平的ＣＤ２５ｔ５＇?。?/p>

體外實驗證明，只有ＣＤ２５?。瑁椋纾璧模茫模词约?xì)胞具有免

疫抑制作用［１２１，表達(dá)ＣＤ２５＇＂｀的ＣＤ４　＇Ｔ細(xì)胞與活化

的記憶性Ｔ細(xì)胞更相似。這種持續(xù)的ＣＤ２５表達(dá)使

得在分離人高純度ＣＤ４＇　ＣＤ２５＋調(diào)節(jié)性Ｔ細(xì)胞和進(jìn)

一步評價該細(xì)胞抑制活性時更加困難。雖然與

ＣＤ４?。唷。茫模玻担{(diào)節(jié)性Ｔ細(xì)胞相關(guān)的細(xì)胞標(biāo)記分子很

多，如糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的腫瘤壞死因子受體家族相

關(guān)受體（ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ－ｉｎｄｕｃｅｄ?。裕危疲遥颍澹欤幔簦澹洹。穑颍铮簦澹椋?，

ＧＩＴＲ）、?。裕铮欤鞓邮荏w－４　（?。簦铮欤欤椋耄濉。颍澹悖澹穑簦铮颍?，　ＴＬＲ４?。?、細(xì)

胞毒性Ｔ淋巴細(xì)胞抗原４?。ā。悖簦铮簦铮椋恪。浴。欤恚穑瑁铮悖簦澹幔螅?/p>

ｓｏｃｉａｔｅｄ?。幔睿簦椋纾澹睿矗。茫裕蹋粒矗?，　ＣＤ１０３等，但目前尚無

一種能很好地區(qū)分ＣＤ４＇　ＣＤ２５ｈ；ｇｈ的調(diào)節(jié)性Ｔ細(xì)

胞困。所以，目前比較通用的使用流式細(xì)胞儀確定

成年人外周血ＣＤ４＇　Ｔ細(xì)胞中ＣＤ２５?。瑁椋纾璞磉_(dá)的標(biāo)準(zhǔn)

是以熒光強(qiáng)度１０’為陰性標(biāo)準(zhǔn)，熒光強(qiáng)度＞１擴(kuò)定為

ＣＤ２５?。瑁椋纾璞磉_(dá)［５，６］。而在臍帶血ＣＤ４＇　Ｔ細(xì)胞中，

Ｃ?。模玻怠。椋睿cＣＤ２５ｈ，ｇｈ表達(dá)在流式細(xì)胞儀散點圖和柱形

圖中能很好地區(qū)分。

試驗中我們發(fā)現(xiàn)，　　　　臍帶血ＣＤ４十Ｔ細(xì)胞約８５％

為ＣＤ４＇?。茫模玻狄唬约?xì)胞，約４％為ＣＤ４｀?。茫模玻担Вⅲ啵约?xì)

胞，約１０％為ＣＤ４十ＣＤ２５?。瑁椋纾枵{(diào)節(jié)性Ｔ細(xì)胞，與

外周血６２％　，３６％和１％一２％比例明顯不同?？紤]

與新生兒接觸外界抗原刺激極少，ＣＤ４＇?。茫模玻狄唬约?xì)

胞未被活化為ＣＤ４?。唷。茫模玻担В睿В约?xì)胞及妊娠期間需要

大量ＣＤ４十ＣＤ２５?。瑁椋纾枵{(diào)節(jié)性Ｔ細(xì)胞來抑制胎兒對母

體的免疫反應(yīng)有關(guān)，該比例隨著新生兒成長及接觸

（下轉(zhuǎn)第４０４頁）　　　　　　　　　　　

·４０４·醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報

２００６年５月第１９卷

排連結(jié)損傷往往僅是脛排前韌帶的撕裂｛８１?；蚝喜ⅲ悖幔臁。颍澹欤澹觯幔睿悖澹郏剩荩樱酰颍纾椋悖幔臁。遥幔洌椋铮欤铮纾椋恪。粒睿幔簦铮恚?，２００３，２５（５）：

骨連結(jié)的破壞，而皺璧大多保持完好。手術(shù)治療中３７９一８６．

廠

一

一

２﹁

一

一應(yīng)避免損傷皺璧，造成癖痕愈合，損害下脛胖連結(jié)的ＬＪＣｌａｎｔｏｎ?。裕?，?。校幔酰臁。校。樱睿洌澹螅恚铮螅椋蟆。椋睿辏酰颍椋澹蟆。椋睢。幔簦瑁欤澹簦澹螅邸。剩荩。疲铮铮簟。粒睿?/p>

ｋｌｅ?。茫欤椋睿椋悖?，　２００２，?。罚ǎ常。海担玻梗担矗梗?/p>

彈性。因此，我們認(rèn)為若選擇螺釘內(nèi)固定，螺釘位置Ｌ

‘

ｓｅ

ｓｅ

?氣

ｓｅ

ｓｅ

ｓｅ

ｓｅ

Ｊｓｅ

ｌ陸震照．躁關(guān)節(jié)損傷的診斷和治療［Ｍ］．上海：上?？茖W(xué)技術(shù)

應(yīng)高于跺關(guān)節(jié)面水平２ｃｍ，以避開皺璧彎窿頂部。文獻(xiàn)出版社，１９９８：?。罚福福保?/p>

ｌ

ｓｅ螺釘應(yīng)適當(dāng)偏前方，從胖骨斜向前上方，與脛排前韌４﹁

ｓｅ

ｓｅ

ｓｅ

ｓｅ

ＬｌＭｉｌｌｅｒ?。遥?，　Ｗｅｉｎｈｏｌｄ?。校樱。模幔瑁睿澹颍蟆。蹋牛。茫铮恚穑幔颍椋螅铮睢。铮妗。簦颍椋悖铮颍簦椋悖幔?/p>

ｓｃｒｅｗ?。椋妫幔簦椋铮睢。觯澹颍螅酰蟆。帷。恚铮洌椋椋妫澹洹。螅酰簦酰颍濉。悖铮睿螅簦颍酰悖簟。妫铮颉。妫椋幔簦椋铮睢。铮妗。幔睿耄欤?/p>

帶纖維走向相平行，鉆人脛骨外側(cè)密質(zhì)，以固定損傷

ｓｙｎｄｅｓｍｏｓｉｓ?。椋睿辏酰颍骸。帷。猓椋铮恚澹悖瑁幔睿椋悖幔臁。螅簦酰洌邸。剩荩希颍簦瑁铮穑幔澹洌椋恪。裕颍幔酰?/p>

較大的下脛排連結(jié)前部。ｍａ，　１９９９，１３（１）：３９－４２．

嚴(yán)重的下脛排連結(jié)損傷，　　　　骨連結(jié)、骨間韌帶、脛［５」

Ｖａｎｄｅｒ　ＧＲ，?。停椋悖瑁澹欤螅铮睢。剩?，?。拢铮睿濉。蹋拢。疲颍幔悖簦酰颍濉。铮妗。簦瑁濉。幔睿耄欤濉。幔睿?/p>

胖前韌帶和脛胖后韌帶完全被破壞，下脛胖連結(jié)完

ｄｉｓｔａｌ　ｐａｔｒｏ?。妗。簦瑁濉。簦椋猓椋幔邸。省。荨。。桑睿螅簦颉。茫铮酰颍螅濉。蹋澹悖簦。保梗梗贰?，　４６（６）：３１１－

３２１．

全分離。此時，我們建議螺釘?shù)奈恢脩?yīng)適度上移，或

［６］Ｄｉｔｔｍｅｒ?。?，　Ｄｅｔｔｍａｎｎ?。牛。裕颍澹幔簦恚澹睿簟。铮妗。簦瑁濉。颍酰穑簦酰颍濉。铮妗。簦瑁濉。洌椋螅簦幔臁。簦椋猓?/p>

選擇兩枚螺釘固定，但最高不應(yīng)超過躁關(guān)節(jié)面水平ｉｏｆｉｂｕｌａｒ　ｓｙｎｄｅｓｍｏｓｉｓ?。鳎椋簦琛埃牛睿纾澹欤猓颍澹悖瑁簦蟆。螅睿洌澹螅恚铮螅椋蟆。猓铮铮耄ⅲ郏剩保?/p>

上５　ｃｍ，，

Ｕｎｆａｌｌｃｈｉｒｕｒｇ，１９９９　，１０２?。ǎ保埃。海罚罚埃罚罚担?/p>

　　　　通過本研究使我們認(rèn)識到，下脛膝連結(jié)的結(jié)構(gòu)

［７］Ｓｕｓａｎ　ＭＬＣ，　Ｈｏｗａｒｄ?。校。牵颍澹纾铮颍。校。樱睿洌澹螅恚铮螅椋蟆。椋睿辏酰颍椋澹螅骸。幔悖酰簦?，

既牢固又具彈性，下脛排連結(jié)損傷的治療應(yīng)采取彈

ｃｈｒｏｎｉｃ，　ｎｅｗ?。簦澹悖瑁睿椋瘢酰澹蟆。妫铮颉。妫幔椋欤澹洹。恚幔睿幔纾澹恚澹睿羧剩剩荩疲铮铮簟。粒睿耄欤?/p>

Ｃｌｉｎｉｃ，?。玻埃埃病?，７?。ǎ常。海担担保担叮担?/p>

性固定。內(nèi)固定可選擇１　－２枚螺釘，距離跺關(guān)節(jié)面［８１

Ｍｅｈｄｉ　Ｍ．?。模睿幔恚椋悖蟆。铮妗。簦椋猓椋铮妫椋猓酰欤幔颉。螅睿洌澹螅恚铮螅椋蟆。椋睢。悖铮颍颍澹欤幔簦椋铮睢。鳎椋簦?/p>

水平２一５?。悖恚磳庸敲苜|(zhì)行彈性固定。ｔｈｅ?。欤澹觯澹臁。铮妗。簦瑁濉。螅睿洌澹螅恚铮簦椋恪。螅悖颍澹鳌。椋睢。恚幔椋螅铮睿睿澹酰觯濉。妫颍幔悖簦酰颍澹蟆。铮妗。簦瑁?/p>

ａｎｋｌｅ?。帷。悖幔洌幔觯澹颉。螅簦酰洌邸。剩荩铡。颍铮穑澹幔睢。省。裕颍幔酰恚?，?。玻埃埃薄。。丁。ǎ玻。海福芬唬保?/p>

參考文獻(xiàn)：

（責(zé)任編輯：蔡明虹；英文編輯：唐文杰）

［１」Ｂａｔｒｏｎｉｃｅｋ　Ｊ．?。粒睿幔簦铮恚。铮妗。簦瑁濉。簦椋猓椋铮妫椋猓酰欤幔颉。螅睿洌澹螅恚铮螅椋蟆。幔睿洹。椋簦蟆。悖欤椋睿椋?/p>

今．今．帶卜今．．令．＂．今，令·今．幸。令．弓）．令．令·今

（上接第４０１頁）ｙｒ　Ｔｃ?。澹欤欤蟆。妫颍铮怼。恚铮酰螅濉。簦铩。恚幔睢。邸。省。荩樱悖幔睿洹。省。桑恚恚酰睿铮?，?。玻埃埃怠?，　６２

外源性抗原增加會相應(yīng)變化。這與有關(guān)文獻(xiàn)中報道（１），１－１５

的數(shù)據(jù)相似「５一〕。［７］　　金伯泉卜細(xì)胞與分子免疫學(xué)ｔＭ］．第２版．北京：科學(xué)出版

社，２００１：１３－１５．

參考文獻(xiàn)：

［８］　?。停幔悖耄幔。桑遥。樱悖椋澹睿悖?，?。恚澹洌椋悖椋睿澹。幔睿洹。簦瑁濉。妫酰簦酰颍澹弧。裕铮欤澹颍幔睿悖濉。幔睿?/p>

ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ?。邸。省。?，ＢＭＪ，　２０００，?。常玻保ǎ罚玻担常?；９３－９６．

Ｃｈｉｓａｒｉ　ＦＶ．?。遥铮酰螅祝瑁椋穑穑欤濉。幔鳎幔颍洹。欤澹悖簦酰颍?；?。觯椋颍酰螅澹螅。椋恚恚酰睿椋簦?/p>

［９］　?。校幔酰螅簟。樱。茫幔睿簦铮颉。龋。遥澹纾酰欤幔簦铮颍。浴。悖澹欤欤蟆。幔睿洹。幔酰簦铮椋恚恚酰睿濉。洌椋螅澹幔螅?/p>

ａｎｄ?。悖幔睿悖澹?；?。欤澹螅螅铮睿蟆。妫颍铮怼。瑁澹穑幔簦椋簦椋蟆。隆。郏剩荩粒怼。省。校幔簦瑁铮?，?。玻埃埃埃?/p>

仁Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ?。遥澹?，?。玻埃埃担玻埃矗ǎ保?；１９５－２０７．

１５６（４）：１１１８－１１３２．

［１０］

Ｂｅｌｋａｉｄ?。?，?。遥铮酰螅濉。拢裕。危幔簦酰颍幔臁。颍澹纾酰欤幔簦铮颍。浴。悖澹欤欤蟆。椋睢。椋睿妫澹悖簦椋铮酰?/p>

［２］Ｈｉｌｌｅｍａｎ?。停遥。希觯澹颍觯椋澹鳌。铮妗。簦瑁濉。穑幔簦瑁铮纾澹睿澹螅椋?，　ｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ，　ａｎｄ

ｄｉｓｅａｓｅ?。郏剩荨危幔簟。桑恚恚酰睿铮?，?。玻埃埃?，６（４）；３５３－３６０．

ｔｈｅｒａｐｅｕｓｉｓ　ｏｆ?。觯椋颍幔臁。瑁澹穑幔簦椋簦椋蟆。拢。鳎椋簦琛。妫铮悖酰蟆。铮睢。颍澹洌酰悖簦椋铮睢。簦铩。穑颍幔悖簦椋?/p>

〔１１］Ａｎｔｏｎｙ?。校粒。遥澹螅簦椋妫铩。危校。谩。模词茫模玻担浴。颍澹纾酰欤幔簦铮颍恪。澹欤欤?，?。椋恚恚酰?/p>

ｃａｌ?。幔穑穑欤椋悖幔簦椋铮顝SＪ］．Ｖａｃｃｉｎｅ，　２００１，１９（１５－１６）；１８３７－１８４８．

ｎｏｔｈｅｒａｐｙ?。铮妗。悖幔睿悖澹颍。幔睿洹。椋睿簦澹颍欤澹酰耄椋睿玻郏剩荩省。桑恚恚酰睿铮簦瑁澹?，

一

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１Ｇｉｔｌｉｎ?。危　。龋澹穑幔簦椋簦椋蟆。?；?。洌椋幔纾睿铮螅椋?，?。穑颍澹觯澹睿簦椋铮?，　ａｎｄ?。簦颍澹幔簦恚澹睿?/p>

２００５，２８（２）??；１２０－１２８．

［Ｊ］．?。茫欤椋睢。茫瑁澹?，１９９７，４３（８　Ｐｔ?。玻海保担埃埃保担埃叮?/p>

［１２］Ｂａｅｃｈｅｒ－Ａｌｌａｎ?。茫。拢颍铮鳎睢。剩?，?。疲颍澹澹恚幔睢。牵剩。澹簟。幔欤。茫模矗А。茫模玻担瑁椋纾?/p>

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．

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ＪＳｈｉｒａｋｉ?。耍。校澹颍椋睿幔簦幔臁。簦颍幔睿螅恚椋螅螅椋铮睢。铮妗。瑁澹穑幔簦椋簦椋蟆。隆。觯椋颍酰蟆。幔睿洹。椋簦蟆。穑颍澹?/p>

ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ?。悖澹欤欤蟆。椋睢。瑁酰恚幔睢。穑澹颍椋穑瑁澹颍幔臁。猓欤铮铮淙剩省梗省。桑恚恚酰睿铮?，

ｖｅｎｔｉｏｎ仁Ｊ］．?。省。牵幔螅簦颍铮澹睿簦澹颍铮臁。龋澹穑幔簦铮?，?。玻埃埃啊?，?。保担ǎ樱酰穑穑臁。海牛保保?/p>

２００１，１６７（３）：１２４５－１２５３．

１５．［１３］

Ｇｒｅｇｇ?。?，?。樱恚椋簦琛。谩。停。茫欤幔颍搿。啤。?，?。澹簟。幔欤。裕瑁濉。睿酰恚猓澹颉。铮妗。瑁酰恚幔睢。穑澹?/p>

［５］

Ｗｉｎｇ　Ｋ，　Ｅｋｍａｒｋ?。?，?。耍幔颍欤螅螅铮睢。?，　ｅｔ?。幔欤。茫瑁幔颍幔悖簦澹颍椋幔簦椋铮睢。铮妗。瑁酰颍椋穑瑁澹颍幔臁。猓欤铮铮洹。茫模矗茫模玻担瑁В纾琛。颍澹纾酰欤幔簦铮颍浴。恪。澹欤欤蟆。椋睿悖颍澹幔螅澹蟆。鳎椋簦?/p>

ｍａｎ?。茫模玻担茫模矗浴。悖澹欤欤蟆。椋睢。簦瑁恚酰?，?。悖铮颍洹。幔睿洹。幔洌酰欤簟。猓欤铮铮?/p>

ａｇｅ?。郏剩荩茫欤椋睿椤。牛稹。桑恚恚酰睿铮欤。玻埃埃担保矗埃ǎ常?；５４０－５４６

［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，?。玻埃埃?，?。保埃叮ǎ玻?；１９０－１９９．

［６］

Ｗｉｎｇ　Ｋ，　Ｅｋｍａｒｋ?。?，?。耍幔颍欤螅螅铮睢。?，?。澹簟。幔欤。茫模矗茫模玻担颍澹纾酰欤幔簦铮ㄘ?zé)任編輯：李風(fēng)華；英文編輯：唐文杰）