在人類中進(jìn)行的概念驗(yàn)證研究的結(jié)果表明，一種用于檢測牲畜結(jié)核病(TB)和副結(jié)核病的新血液測試可適合作為人類結(jié)核分枝桿菌(Mtb)感染的快速主流診??斷方法。一種篩查工具，以識(shí)別有患結(jié)核病風(fēng)險(xiǎn)的人。

這項(xiàng)名為Actiphage TM的測試是由諾丁漢大學(xué)的研究人員開發(fā)的。美國國立衛(wèi)生研究院(NIHR)萊斯特生物醫(yī)學(xué)研究中心(BRC)的研究人員和合作者報(bào)告了他們對(duì)Actiphage診斷人類結(jié)核病的初步評(píng)估報(bào)告，表明他們的研究結(jié)果支持無癥狀過渡性結(jié)核病的存在?？赡茈S后發(fā)展成活動(dòng)性疾病的狀態(tài)。

研究小組在《臨床傳染病》中描述了其發(fā)現(xiàn)。Pranabashis Haldar博士說：“我們的觀察結(jié)果為人類結(jié)核病的發(fā)展提供了新見解，并支持最近存在的一種結(jié)核病過渡狀態(tài)的證據(jù)，即初始結(jié)核病，它不會(huì)產(chǎn)生癥狀，但具有發(fā)展為活動(dòng)性結(jié)核病的高風(fēng)險(xiǎn)，” ，萊斯特大學(xué)的臨床高級(jí)講師，萊斯特醫(yī)院的呼吸內(nèi)科顧問。“作為一項(xiàng)血液檢查，它特別適合于無法產(chǎn)生痰液的患者，包括兒童，并可能有助于為服務(wù)不足，難以獲得免費(fèi)醫(yī)療資源的人群的診斷提供支持。”

該小組的已發(fā)表論文的標(biāo)題為“ 一種新穎的基于高靈敏度噬菌體的檢測方法，可以鑒定出具有免疫活性的結(jié)核病患者和初期結(jié)核病患者的低水平結(jié)核分枝桿菌菌血癥。”

這組作者解釋說，全世界約有四分之一的人口患有結(jié)核分枝桿菌感染，這是導(dǎo)致傳染病死亡的主要原因。“它最常見地影響到肺部，并且通過咳嗽和打噴嚏從這個(gè)部位傳播給其他人，” Haldar評(píng)論道。“由于缺乏無法診斷痰的診斷工具，診斷被延遲，增加了疾病傳播的可能性。”

在大多數(shù)情況下，Mtb細(xì)菌會(huì)建立所謂的潛伏性結(jié)核感染(LTBI)，這種感染不會(huì)引起任何癥狀，但通常在兩年內(nèi)，約有5-10%的LTBI患者會(huì)繼續(xù)發(fā)展為結(jié)核病。研究人員寫道，這種轉(zhuǎn)化為活動(dòng)性結(jié)核的基礎(chǔ)機(jī)制尚未得到很好的了解。

檢測Mtb可能會(huì)出現(xiàn)問題，因?yàn)樵撋矬w生長非常緩慢，這使傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法效率低下。鑒定Mtb DNA的分子測試也受到限制，因?yàn)樵摷?xì)菌堅(jiān)韌的細(xì)胞壁使其難以提取DNA。結(jié)核病是傳染病致死的主要原因。它最常見地影響到肺部，并且通過咳嗽和打噴嚏從該部位傳播給其他人。” Haldar指出。“由于缺乏無法診斷痰的診斷工具，診斷被延遲，增加了疾病傳播的可能性。”

諾丁漢研究人員開發(fā)的Actiphage測試?yán)昧艘环N噬菌體，該噬菌體通過穿透細(xì)菌細(xì)胞壁并釋放Mtb DNA來特異性感染Mtb。然后可以擴(kuò)增和檢測DNA。整個(gè)測試過程可以在大約六個(gè)小時(shí)內(nèi)完成。Actiphage由PBD Biotech商業(yè)化，用于診斷牲畜的Mtb疾病，主要用于牛結(jié)核病和Johne病的血液或牛奶檢測。諾丁漢大學(xué)微生物學(xué)副教授凱瑟琳·里斯博士解釋說：“ Actiphage是一種針對(duì)分枝桿菌的新型血液測試，旨在鑒定飼養(yǎng)動(dòng)物中的分枝桿菌感染，幫助農(nóng)民控制這些困難的疾病。” PBD Biotech的CSO。

為了首次對(duì)人體進(jìn)行測試，研究人員在四個(gè)隊(duì)列中招募了66個(gè)人，其中包括15例活動(dòng)性肺結(jié)核(PTB)，18例潛伏性結(jié)核感染(LTBI)，對(duì)照組5例非結(jié)核呼吸系統(tǒng)疾病和健康個(gè)體的對(duì)照組。使用Actiphage對(duì)所有患者進(jìn)行兩次測試，相隔12個(gè)月。

發(fā)現(xiàn)該測試證明了73.3%的敏感性和100%的特異性。重要的是，沒有任何對(duì)照患者的測試陽性，而使用Actiphage測試為陰性的LTBI患者也沒有繼續(xù)發(fā)展為活動(dòng)性結(jié)核病。有趣的是，在使用Actiphage測試呈陽性的LTBI的三名參與者中，有兩名確實(shí)在六個(gè)月后繼續(xù)發(fā)展活動(dòng)性結(jié)核病。盡管這些患者在三個(gè)月的隨訪階段沒有活動(dòng)性結(jié)核的臨床或放射學(xué)證據(jù)，但他們的血液中確實(shí)有可檢測到的Mtb。

這組作者寫道：“我們的數(shù)據(jù)表明，初期疾病與早期感染期間血液中的Mtb有關(guān)，并且可以通過檢測血液中的Mtb來鑒定。” 實(shí)際上，該測試在大多數(shù)具有活動(dòng)性PTB和單器官疾病臨床特征的參與者中檢測到循環(huán)Mtb，這表明低度菌血癥低于現(xiàn)有技術(shù)的敏感性閾值。作者評(píng)論說，細(xì)菌血癥也與更大的疾病程度有關(guān)。“相反，未能檢測到四名臨床上較溫和疾病表達(dá)的PTB參與者的血液中的Mtb表明，早期疾病具有明顯的表型，其特征是有效免疫介導(dǎo)的Mtb保留在肺中，任何循環(huán)細(xì)菌的水平均低于敏感性水平測定的閾值。”

里斯指出：“我們從人類的初步研究中獲得的數(shù)據(jù)表明，感染后，Mtb在血液中循環(huán)的水平以前是無法檢測到的，并且免疫系統(tǒng)可能無法有效地在肺部容納細(xì)菌。”

研究人員得出的結(jié)論是，盡管他們的研究結(jié)果可能只是初步的，但該研究表明“ Actiphage作為一種基于血液的傳染性PTB診斷工具的早期承諾可以改善無法排痰的患者的早期診斷。”盡管該測試將需要進(jìn)行一些修改以簡化樣品制備和分子檢測，可在資源不足的情況下使用。里斯說：“盡管我們對(duì)從少量樣本中得出結(jié)論持謹(jǐn)慎態(tài)度，但我們樂觀地認(rèn)為，這些初步發(fā)現(xiàn)表明Actiphage可作為一種工具來幫助我們更好地了解人類感染的動(dòng)態(tài)。” “新的Actiphage血液測試提供了針對(duì)有結(jié)核病風(fēng)險(xiǎn)的人的潛力，并允許及早開始治療。這是一個(gè)非常令人興奮的發(fā)展，需要進(jìn)一步的研究。”