一種新的動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)肥大細胞表征方法

研究人員使用一種新的流式細胞儀分析方法，設(shè)計出一種精確的方法，通過獨特的表面蛋白鑒定這些斑塊內(nèi)肥大細胞的特定亞群，并確定其激活機制。對這些動脈粥樣硬化介質(zhì)的詳細了解為開發(fā)人類動脈粥樣硬化的新療法提供了重要機會。

發(fā)表在“ 細胞 ”雜志上的研究結(jié)果建立在之前的研究基礎(chǔ)上，該研究已經(jīng)確定了CD117 + FcεRI +斑塊內(nèi)肥大細胞亞型在斑塊發(fā)育，進展和去穩(wěn)定中的特定作用。然而，它們的表征以前依賴于免疫組織化學(xué)，其僅通過少數(shù)表面標記物表征細胞身份。

反過來，這限制了科學(xué)家精確表征肥大細胞的能力，包括其激活狀態(tài)的知識?，F(xiàn)在，Kritikou 等人開發(fā)了基于流式細胞儀的方法。，已經(jīng)啟用了基于多標記的特定肥大細胞類型的鑒定，以及它們在人動脈粥樣硬化斑塊中存在的激活狀態(tài)。

用免疫組織化學(xué)和流式細胞儀檢測

Kritikou教授及其團隊開發(fā)了一種新的流式細胞術(shù)方法，可以使用多種細胞標記準確確定肥大細胞的身份和活化狀態(tài)。Kritikou和她的團隊一起描述了它們在動脈粥樣硬化中的病理作用的激活機制。

已知肥大細胞活化主要通過與其高親和力受體FcεRI結(jié)合的抗體IgE的復(fù)合物發(fā)生。這使它們對抗原結(jié)合敏感。響應(yīng)于抗原，IgE-FcεRI復(fù)合物的交聯(lián)激活肥大細胞，最終釋放免疫應(yīng)答介質(zhì)。

Kritikous的數(shù)據(jù)證實，這種經(jīng)典模型提供了斑塊內(nèi)肥大細胞的主要激活機制。這些活化IgE片段的進一步表征揭示了它們在斑塊組織中的位置，證實了循環(huán)IgE水平與災(zāi)難性心血管事件之間的相關(guān)性。他們的研究表明IgE是心血管事件發(fā)生的危險因素，并提供了對過敏和動脈粥樣硬化如何聯(lián)系的理解。

Kritikou和她的團隊分析了從患者的股動脈和頸動脈部位收集的22個動脈粥樣硬化斑塊樣本。進行免疫組織化學(xué)染色以鑒定肥大細胞。隨后用針對特征性表面標志物(CD45，CD117，F(xiàn)cεRI，CD117和IgE)的熒光標記物以及在肥大細胞活化時釋放的顆粒介質(zhì)，類胰蛋白酶進行抗體染色，用于流式細胞術(shù)分析。為了確定它們的活化狀態(tài)，研究人員篩選了共同存在的CD63，一種脫顆粒的介質(zhì)和一種脫顆粒的敏化劑IgE。

主要肥大細胞激活途徑 - 發(fā)掘基于IgE的治療靶點

流式細胞術(shù)的使用使得幾種標記物能夠用于鑒定負責促進患者的動脈粥樣硬化進展的肥大細胞的特定亞群。進一步的激活篩查顯示，來自兩個位置的肥大細胞均為兩種標記物IgE和CD63陽性，表明它們具有高度活化狀態(tài); 人類動脈粥樣硬化進展的已知標志物。

在沒有任何結(jié)合在表面的IgE片段的情況下，少部分斑塊內(nèi)肥大細胞被激活。這一發(fā)現(xiàn)使研究人員得出結(jié)論，CD117 + FcεRI +斑塊內(nèi)肥大細胞亞型激活的主要手段是通過IgE與FcεRI的結(jié)合而發(fā)生的，而少量細胞是獨立于IgE而激活的。正如Kritikou和研究人員所說，這些研究結(jié)果通過針對人類動脈粥樣硬化中IgE介導(dǎo)的作用為潛在的治療干預(yù)鋪平了道路。”，

希望進一步研究肥大細胞功能，揭示新的激活途徑，這將為開發(fā)抗動脈粥樣硬化進展的新療法提供機會。

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