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        標(biāo)記基因組原位
        
			
        
				2019-03-13 09:13:25
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			  來(lái)源：
			
        
		
        
				
		
        
			
        自2012年提出其機(jī)制以來(lái)，CRISPR / Cas9基因組編輯工具一直在科學(xué)界引起漣漪，許多科學(xué)家已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了Cas9蛋白質(zhì)的剪刀樣特性的不同應(yīng)用。在今天發(fā)表在新植物學(xué)家的一項(xiàng) 研究中，來(lái)自萊布尼茨植物遺傳學(xué)和作物植物研究所的研究人員提出了一種利用RNA /蛋白質(zhì)復(fù)合物的新方法 - 在染色體水平上原位標(biāo)記和可視化DNA。
        

        標(biāo)記基因組原位
        

        在過去的30年中，熒光原位雜交(FISH)已經(jīng)成為DNA分子可視化的既定方法。然而，F(xiàn)ISH需要DNA變性，這會(huì)破壞樣品的結(jié)構(gòu)。通過將他們的新方法基于CRISPR / Cas9，研究人員設(shè)法繞過這個(gè)變性步驟，同時(shí)仍然整合了傳統(tǒng)FISH方法所需的熒光標(biāo)記特性。
        

        作為新的細(xì)胞遺傳學(xué)工具，稱為RNA引導(dǎo)的核酸內(nèi)切酶原位標(biāo)記(RGEN-ISL)，保留了樣本的結(jié)構(gòu)，它開辟了研究基因組時(shí)空結(jié)構(gòu)的可能性。另外，它可以與蛋白質(zhì)檢測(cè)方法結(jié)合，以允許標(biāo)記過程的實(shí)時(shí)可視化，這可以揭示反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)。
        

        此外，研究人員表明，RGEN-ISL優(yōu)于傳統(tǒng)方法組合，如FISH和免疫組化。RGEN-ISL需要較少的制備，相對(duì)更快和更便宜，并且可以在4°C至37°C的寬溫度范圍內(nèi)發(fā)揮作用。
        

        RGEN-ISL
        

        到目前為止，研究人員不僅測(cè)試了植物樣品中的RGEN-ISL，還測(cè)試了人類染色體中的RGEN-ISL，說明該方法可能適用于所有生物體。目前，該方法的使用局限于重復(fù)的DNA序列，其通常在植物基因組中發(fā)現(xiàn)。然而，根據(jù)第一作者石井隆義(Takayoshi Ishii)構(gòu)思了RGEN-ISL背后的初步想法，這種方法可能適用于將來(lái)甚至單拷貝序列的可視化。
        
			

			
          
        
			
        
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