分泌物濕片
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分泌物濕片(生理鹽水直接涂片)檢查
深圳市寶安區(qū)龍華人民分泌物濕片(生理鹽編號(hào):
醫(yī)院檢驗(yàn)科水直接涂片)檢查版本1
體液檢驗(yàn)室頁數(shù):
1原理
通過理學(xué)方法及生物顯微鏡對新鮮分泌物進(jìn)行檢查,以觀查其顏、PH、
清潔度、和有無特殊細(xì)菌及細(xì)胞等。
2標(biāo)本采集
2.1標(biāo)本采集前病人準(zhǔn)備:在采集標(biāo)本前24小時(shí)內(nèi)無、無盆浴、無灌
洗、無放置藥物、近期內(nèi)未服用激素藥物。
2.2標(biāo)本種類:新鮮分泌物。
2.3標(biāo)本要求:所用器具應(yīng)清潔干燥、無污染、無化學(xué)藥品(如酒精、肥皂水),
標(biāo)本采集時(shí)禁用各種潤劑(如石蠟油)。
2.4標(biāo)采集:分泌物由婦產(chǎn)科醫(yī)師采集,用消毒棉拭子從后穹窿部蘸
取,并將其置入含有0.5ml~1.0ml生理鹽水的試管內(nèi),或用璃吸管,插入后穹
窿部吸取分泌物,制成薄涂片,立即送檢。也可用窺陰器擴(kuò)張后刮取子宮頸分
泌物,加一滴生理鹽水涂成薄片,立即送檢。
3標(biāo)本存放:標(biāo)應(yīng)保持新鮮,溫度應(yīng)保持在25℃~37℃之間,一般不超過2小
時(shí)。
4標(biāo)本運(yùn)輸:放入潔凈玻璃試管內(nèi),室溫運(yùn)輸。
5標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)本污染、不新鮮,取材不當(dāng)不能檢測。
6試劑:
6.1生理鹽水。
6.22.5mol/LKOH溶液(KOH140g溶于1000ml蒸餾水中)。
7實(shí)驗(yàn)器材:生物顯微鏡,載玻片。
8操作步驟:
8.1取分泌物先作一般性外觀檢查。后滴加1滴生理鹽水,制成涂
片。低倍鏡觀察后,再用高倍鏡檢查,根據(jù)上皮細(xì)胞、白細(xì)胞(或膿細(xì)胞),桿
菌、球菌的多少,判斷清潔度。
8.2檢查清潔度的同時(shí),高倍鏡觀察有無毛滴蟲。并查找線索細(xì)胞。
8.3于分泌物涂片上加1滴2.5mol/LKOH,聞一聞是否有魚腥氣味,混
勻后加蓋玻片,先用低倍鏡觀察,若發(fā)現(xiàn)有菌絲樣物,再換高倍鏡檢查有無真菌。
9質(zhì)量控制
9.1要把好標(biāo)本的采集送檢關(guān),按時(shí)按要求送檢。如果取材不當(dāng),不及時(shí)送檢,
陽性結(jié)果可變成陰性結(jié)果。分泌物應(yīng)取自后穹窿,采集后也要防止外來
污染,及時(shí)送檢,否則滴蟲將死去,淋病奈瑟雙球菌會(huì)自溶,這些均可能影
響陽性檢出率。
9.2要熟悉所做檢查標(biāo)本的各種正常成分及其數(shù)量變化,注意濕片中的異常,
如紅細(xì)胞,成堆的白細(xì)胞,真菌和滴蟲;熟悉所檢病原體的形態(tài)特征,才能
作出準(zhǔn)確可靠的報(bào)告。
9.3注意治療藥物的影響。在取材檢驗(yàn)前應(yīng)停用對結(jié)果有干擾的一切藥物,如
抗生素和一切外用藥。取分泌物時(shí)應(yīng)停外用藥2~3d,24h內(nèi)無,以提
高陽性檢出率。
9.4涂片應(yīng)厚薄適宜。
9.5統(tǒng)一操作方法和報(bào)告方式,嚴(yán)格控制各種影響因素。如所用玻璃器材應(yīng)干
凈;涂片做到取材統(tǒng)一或定量,檢驗(yàn)及時(shí),觀察標(biāo)準(zhǔn)一致。掌握好方法學(xué)的各個(gè)
環(huán)節(jié),濕片檢驗(yàn)應(yīng)以高倍視野報(bào)告。并應(yīng)加強(qiáng)與臨床科室聯(lián)系,注意復(fù)查。
10檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析
10.1正常白帶為白、非均質(zhì)性、粘稠、絮狀、無臭味的分泌物,當(dāng)女性生
殖道發(fā)生病變時(shí),白帶也發(fā)生異常變化,常可以有如下改變:
①膿性白帶(LeucorrheawithPus):黃、黃綠、有臭味,多為滴蟲或
化膿性細(xì)菌感染引起,泡沫狀膿性白帶常見于滴蟲性炎,其他膿性白帶見于
慢性炎、異物、子宮內(nèi)膜炎等。
②血性白帶(LeucorrheawithBlood):白帶內(nèi)混有血液,量不定,有特殊
臭味,可見于惡性腫瘤,如宮頸癌、宮體癌、子宮粘膜下肌瘤和宮內(nèi)節(jié)育環(huán)等。
③豆腐渣樣白帶(LeucorrheawithResidue):呈豆腐渣樣或凝狀小塊,
多見于念珠菌性炎,并有外陰瘙癢。
④無透明樣白帶(ColorlessandLimpidLeucorrhea):可見于應(yīng)用雌激
素藥物和卵巢顆粒細(xì)胞瘤。
10.2清潔度結(jié)果判斷見下表
清潔度桿菌球菌上皮細(xì)胞白細(xì)胞或膿細(xì)胞
Ⅰ4+-4+0~5/HP
Ⅱ2+-2+5~15/HP
Ⅲ-2+-15~30/HP
Ⅳ-4+->30/HP
10.3滴蟲檢驗(yàn):通常與清潔度過同時(shí)進(jìn)行檢驗(yàn),毛滴蟲(trichomonas
vaginalis,TV)為寄生于的致病性原蟲。鏡下觀察蟲體運(yùn)動(dòng)活潑,鞭毛快速
擺動(dòng),蟲體呈梨形或橢圓形,無透明,蟲體比白細(xì)胞大2~3倍。在蟲體前1/3
處有一長圓形的細(xì)胞核,核的前端有4根鞭毛和1根后鞭毛,有1根細(xì)長的軸柱
由前向后貫穿蟲體并伸出體外。如發(fā)現(xiàn)滴蟲,即可報(bào)告:滴蟲陽性。
10.4真菌檢查:真菌亦稱假絲酵母菌,種類繁多,但使人類致病者85%為
白念珠菌,是真菌性炎的病原體,炎癥較頑固,分泌物常呈“豆渣樣”。
檢測方法同滴蟲檢驗(yàn)。必要時(shí)于涂片上加一滴2.5ml/lKOH溶液,混勻并加
蓋玻片,先以低倍鏡檢查,發(fā)現(xiàn)菌絲樣物,再轉(zhuǎn)高倍鏡檢查,或直接用高倍鏡檢
查。高倍鏡下檢見單個(gè)或成卵圓形、無透明的孢子,常為牙生或多個(gè)連成鏈
狀者,即可報(bào)告“發(fā)現(xiàn)真菌”。
10.5菌與線索細(xì)胞檢驗(yàn)
細(xì)菌性炎(bacterialvaginosis,BV),過去稱為非特異性炎,加
特納(gardnerlla)菌炎嗜血桿菌炎等。1984年國際會(huì)議定名為細(xì)菌性
炎。檢查時(shí)將分泌物與等滲鹽水等量混合,制成厚薄適宜的涂片,加蓋
片于高倍下觀察有無線索細(xì)胞。線索細(xì)胞又稱克魯細(xì)胞(cluecells),乃是陰
道鱗壯上皮細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)寄生了大量加特納菌及其他短小桿菌,上皮細(xì)胞互相粘
連成團(tuán),細(xì)胞邊緣不齊似鋸齒壯,表面粗糙,有許多大小不等的顆?;虬唿c(diǎn),似
撒有一層胡椒粉,核模糊不清或碎解,有時(shí)細(xì)胞呈溶解樣。
細(xì)性炎診斷標(biāo)準(zhǔn):①分泌物稀薄均勻;②分泌物的PH值(用
PH試紙?jiān)囍?4.5;③胺試驗(yàn)呈陽性(即向分泌物中滴加2.5mol/LKOH溶液
時(shí)出現(xiàn)魚腥氣味);④濕片檢出線索細(xì)胞,Gram染見特定菌分布,凡檢見
線索細(xì)胞再加上上述任意兩條,診斷即可成立。線索細(xì)胞是診斷的必要標(biāo)準(zhǔn)之一。
11參考范圍
外觀為白、非均質(zhì)性、粘稠、絮狀、無臭味的分泌物,清潔度Ⅰ~Ⅱ
度,無致病菌和特殊細(xì)胞。滴蟲、霉菌為陰性。
12臨床意義
12.1清潔度:⑴正常女性生殖系統(tǒng)的組織解剖學(xué)和生化特點(diǎn),能防御外
界病原微生物侵襲:從新生兒期到青春期,雙側(cè)大小合攏嚴(yán)密,處女膜完整,
前后壁貼接,宮腔閉合;在青春期,由于雌激素等作用,上皮細(xì)胞(多
含有不等程度的糖原)發(fā)生周期性變化,脫落后的細(xì)胞釋出糖原,借桿菌的
作用,將糖原轉(zhuǎn)化為酸,后者使PH保持4~4.5之間,此種環(huán)境唯有
桿菌能生存。正常健康婦女,本身有自凈作用,涂片見桿菌和鱗狀
上皮細(xì)胞較多,而白細(xì)胞和膿細(xì)胞較少、球菌則更罕見;及絕經(jīng)期婦女,因
缺乏雌激素作用,內(nèi)無桿菌生存,PH可達(dá)7,易受病菌感染。
⑵病理情況,清潔度Ⅲ~Ⅳ為異常,主要見于各種炎。如細(xì)菌性、霉菌
性、滴蟲性炎,并同時(shí)可發(fā)現(xiàn)有關(guān)病原體;單純清潔度改變常見于非特異性
炎,包括化膿性感染性炎、嗜血桿菌性炎、老年性或嬰幼兒的
炎。
清潔度差,還見于:輸卵管或子宮腔炎癥、異物、贅生物、宮頸內(nèi)管
及宮頸的炎癥或贅生物,本身的創(chuàng)傷(如流產(chǎn)、產(chǎn)后因產(chǎn)道創(chuàng)傷所致)。此
外,正常女性在排卵前期清潔度好,在行經(jīng)期和絕經(jīng)期,清潔度差。
非特異性炎,常見鏈球菌、葡萄球菌、腸球菌、大腸桿菌等;特異性
炎:主要有滴蟲性、霉菌性、阿米巴性及加特納菌等。
依據(jù)清潔度的高低可以估計(jì):如有病原體侵襲,是否容易發(fā)生感染;如在
手術(shù)前發(fā)現(xiàn)為第三或第四清潔度時(shí),應(yīng)先治療炎癥,然后手術(shù);當(dāng)桿菌
少時(shí),表示的酸堿度高,其抗病力降低,易引起感染。
12.2分泌物霉菌檢查:
⑴霉菌多為白念珠菌,診斷以找到霉菌為依據(jù)。白念珠菌平時(shí)可
寄生在內(nèi),當(dāng)內(nèi)糖原增多,酸度上升時(shí),可迅速繁殖。其形態(tài),在生長
受抑制環(huán)境中,以短桿狀存在,而在有利于繁殖的環(huán)境中,則變成有絲的霉菌;
在這兩種形態(tài)之間,還有其他形態(tài),故作顯微鏡檢查時(shí),應(yīng)慎重。
⑵白念珠菌感染,常見于:糖尿病患者、孕婦、大量使用廣譜抗生
素或腎上腺皮質(zhì)激素造成菌紊亂者。白念珠菌的寄生率:非孕婦16%,
孕婦50%;發(fā)病率:非孕婦1%~2%,孕婦5%~10%,糖尿病患者5.3%。長
期使用含葡萄糖溶液維持營養(yǎng)的患者也易罹患。此外,維生素B缺乏,免疫機(jī)
制減弱或使用免疫抑制劑者也可發(fā)生白念珠菌感染。
12.3菌和線索細(xì)胞:
⑴生理?xiàng)l件下,的PH為酸性(4~4.5),只有桿菌能存活,而其
他球、桿菌均不能生存。在顯微鏡油鏡下,可見桿菌6~30個(gè),而加特納菌
則無或極少。
⑵病理情況下,細(xì)菌性炎時(shí)(1984年國際定名為BV),如加特納菌
等感染,炎癥不明顯,白細(xì)胞不多。
12.4毛滴蟲:
⑴生理情況下,PH為4~4.5,不適宜毛滴蟲生存(其最適PH為
5.5~6.0),故不引起女性生殖道滴蟲性炎。
⑵病理情況下,滴蟲可寄生于后穹隆,常引起滴蟲性炎,可合
并鄰近器官的感染,如尿道和尿道旁腺感染。滴蟲能利用上皮細(xì)胞內(nèi)糖原作為能
源進(jìn)行直接分裂,主要傳播途徑是通過衣物和。在男性,滴蟲可寄生于包皮
下、前后尿道、前列腺(最多見,占90%)、精囊內(nèi),可長時(shí)間持續(xù)存在,具感
染性,經(jīng)直接或間接方法傳播。毛滴蟲感染的發(fā)病率,在男性可達(dá)2%~
15%,女性則達(dá)10%~25%。男性常為攜帶者。滴蟲也引起泌尿道癥狀和不孕
癥。
13操作性能
快速簡便、特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高。
14超出范圍結(jié)果處理
⑴清潔度檢查,應(yīng)配合微生物、寄生蟲檢查,以明確炎的性質(zhì),
有利于臨床診斷和治療;還可結(jié)合尿液檢查,觀察泌尿生殖系統(tǒng)有無互相影響。
⑵菌和線索細(xì)胞可作革蘭染油鏡下觀察,見桿菌每視野只
有1~5個(gè)或缺如,而其他雜菌增高,即有助于診斷;必要時(shí)做細(xì)菌培養(yǎng),并結(jié)
合清潔度檢查,可對細(xì)菌性炎作出診斷。
⑶分泌物霉菌檢查可作陰分泌物霉菌培養(yǎng)檢查,并選用適當(dāng)培養(yǎng)基
以提高陽性檢出率。
⑷毛滴蟲采用涂片染,敏感性和陽性檢出率高;此外免疫法(膠
凝集快速試驗(yàn)LAT),簡便快速,陽性檢出率比培養(yǎng)法高;培養(yǎng)法,使用于輕
癥、帶蟲或慢性感染患者,陽性檢出率可達(dá)98%,但操作繁雜時(shí)間長;必要時(shí),
可用熒光抗體、DNA探針等檢測,以提高敏感性。
15方法局限性
⑴取材要準(zhǔn)確,并及時(shí)送檢。否則會(huì)導(dǎo)致毛滴蟲死亡、淋病奈瑟菌
自溶。
⑵標(biāo)本必須新鮮,防止污染(包括藥物和潤滑劑等);
⑶標(biāo)本應(yīng)注意保溫,迅速送檢,不能冷藏,以便發(fā)現(xiàn)活動(dòng)狀態(tài)的滴蟲;
⑷濕片檢查為陰性時(shí),應(yīng)再用瑞氏染或革蘭染,一次陰性檢查不能
排除診斷。
16當(dāng)檢驗(yàn)系統(tǒng)(儀器)不能工作時(shí),所采取的補(bǔ)救措施
檢查電路及光源,注意是否燈泡燒壞,如燈泡燒壞,則更換燈泡。如一
時(shí)不能修好,更換同類生物顯微鏡檢驗(yàn)。
17參考文獻(xiàn)
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