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        分泌物檢查詳解

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        2022年4月17日發(fā)(作者:青浦中山醫(yī)院)

        分泌物檢查

        拼音yīndàofēnmìwùjiǎnchá

        英文參考examinatiampleofvaginaldischarge

        分泌物標(biāo)本的采集

        分泌物(vaginaldischarge)為女性生殖性系統(tǒng)分泌的液體,俗稱

        “白帶”。主要來自宮頸腺體、前庭大腺,此外還有子宮內(nèi)膜、

        粘膜的分泌物等。

        標(biāo)本采集前24小時,禁止,盆浴、檢查、灌洗及

        局部是藥等,以名勝影響檢查結(jié)果。取材所用消毒的刮板,吸管或棉

        拭子必須清潔干燥,不粘有任何化學(xué)藥品或潤滑劑。窺器插入前

        必要時可用少許生理鹽水濕潤。根據(jù)不同的檢查目的可自不同部位取

        材。一般采用鹽水浸濕的棉拭子睚深部或穹后部、宮頸管口

        等處取材,制備成生理鹽水涂片以觀察分泌物。生理鹽水懸滴可

        檢查滴蟲,涂制成薄片以95%乙醇固定,經(jīng)過巴氏染,吉姆薩染

        升革蘭氏染,進(jìn)行腫瘤細(xì)胞篩查或病原微生物檢查。

        分泌物外觀及清潔度檢查

        在生量狀態(tài)下,女性生殖系統(tǒng)由于的組織解剖學(xué)和生物化學(xué)特點

        足以防御外界病原微生物的侵襲。從新生兒到青老大爺期,雙側(cè)大小

        合攏嚴(yán)緊,外女膜完整,前后壁貼接,使管腔閉合,以青春

        期后,由于雌激素的影響,上的上皮由單層變?yōu)閺?fù)層。上皮細(xì)胞

        內(nèi)底層外,均含有不同量的糖原,同時受卵巢功能的影響,有周期的

        變化及脫落,脫落后細(xì)胞破壞放出糖原,借桿菌作用,將糖原轉(zhuǎn)

        化為酸,使PH保持在4-4.5之間,只有桿菌能在此環(huán)境

        中生存。因此在正常健康婦女,本身有自凈作用,形成自然防御

        功能。

        分泌物一般性狀檢查

        檢查正常分泌物為白稀糊狀,一般無氣味,量多少不特恙雌激

        素水平高低及生殖器官充血情況有關(guān),于近排卵期白帶量多,清澈透

        明、稀薄似雞旦清,排卵期2-3天后白帶混濁粘稠、量少、行經(jīng)前量

        又增加。妊娠期白帶量較多。

        白帶異??杀憩F(xiàn)為、質(zhì)、量的改變:

        1.大量無包透明粘白帶常見于應(yīng)用雌激素藥物后及卵巢顆粒細(xì)胞瘤

        時。

        2.膿性白帶:黃或綱綠有臭味,多為滴蟲或化膿性細(xì)菌性感染

        引起的;泡沫疚狀膿性白帶,常見于滴蟲性炎;其它膿性白帶見

        于慢性宮頸炎、老年性炎、子宮內(nèi)膜炎、宮腔積膿、異物等。

        3.豆腐渣樣白帶:呈豆腐查樣或凝狀小碎塊,為念珠菌炎所

        特有,常伴有外陰瘙癢。

        4.血性白帶:內(nèi)混有血液,血量多少不定,有特殊臭味。對這類白

        帶應(yīng)警惕惡性腫瘤的可能,如宮頸癌、宮體癌等,有時某些宮頸息肉、

        子宮粘膜下肌瘤、老年性炎、重度慢性宮頸炎和宮內(nèi)節(jié)育器引起

        的副反應(yīng)也可在白帶中見到血液。

        5.黃水樣白帶:由于病變組織的變性、環(huán)死所致。常發(fā)生于子宮

        粘膜下肌瘤,宮頸癌、子宮體癌、輸卵管癌等。

        分泌物清潔度檢查

        將分泌物加生理鹽水作涂片,用高倍鏡檢查,主要依靠白細(xì)胞、

        上皮細(xì)胞、桿菌與雜菌的多少劃分清潔度,見表12-1。

        表12-1分泌物清潔度分級

        清潔度

        所見成分

        臨床意義

        Ⅰ度

        大量桿菌和上皮細(xì)胞,白細(xì)胞0-5/HPF,雜菌無或極少

        正常

        Ⅱ度

        中等量桿菌和上皮細(xì)胞,白細(xì)胞10-15/HPF,雜菌少量

        亦屬正常

        Ⅲ度

        少量桿菌和上皮細(xì)胞,白細(xì)胞15-50/HPF,雜菌較多

        提示有炎癥

        Ⅳ度

        無桿菌有少量上皮細(xì)胞,白細(xì)胞>30/HPF,大量雜菌

        多見于嚴(yán)重的炎

        卵巢功能不足、雌激素減低,上皮增生較差時可見到桿菌減

        少,易感染雜菌。單純清潔度不好而未發(fā)現(xiàn)病原微生物,為非特異性

        了道炎。當(dāng)清潔度為Ⅲ~Ⅳ度時??赏瑫r發(fā)現(xiàn)病原微生物,提示存在

        感染引起的炎。

        分泌物微生物檢查

        (一)原蟲

        引起感染的原蟲主要有是毛滴蟲,可致滴蟲性炎。病人

        外陰灼熱痛、瘙癢,分泌物呈稀膿性或泡沫狀,將此分泌物采用

        生理鹽水懸滴法置于低倍顯微鏡下觀察,可見波動狀或螺旋狀運動的

        蟲體將周圍白細(xì)胞或上皮細(xì)胞推動。在高倍鏡下可見蟲體為8-45μ

        m,呈項寬尾尖倒置梨形,大小多為白細(xì)胞的2-3倍,蟲體項端有前

        鞭毛4根,后端有后鞭毛一根,體側(cè)有漢動膜,借以移動。此時

        分泌物的清潔度為Ⅲ、Ⅳ度。

        貌岸然毛滴蟲生長繁殖的適宜溫度為25-42攝氏度,故在檢驗時

        應(yīng)注意保溫,方可觀察到毛滴蟲的活動。分泌物中查到

        分泌物滴蟲是診斷滴蟲性炎的依據(jù),近年來采用毛滴蟲單抗

        制的膠免疫凝聚法劑盒可提高滴蟲性炎的診斷率。

        在分泌物中見到溶組織阿米巴滋養(yǎng)體時,提示為阿米巴性

        炎。

        (二)真菌

        真菌有時在中存奪而無害,在抵抗力減低時容易發(fā)病,

        真菌性炎發(fā)找到真菌為診斷依據(jù),真菌多為白假絲酵母

        菌,偶見纖毛菌、放線菌等。采用懸滴法于低倍鏡下可見到白

        絲假酵母菌的卵圓形孢子和假菌絲。如取分泌物涂片并時行革蘭

        氏染后油觀察,可見到卵圓形革蘭氏陽性孢子或與出芽細(xì)胞相連接

        的假菌絲,成鏈狀及分支狀。

        (三)淋病奈瑟菌

        淋病是目前世界上發(fā)病率較高的性傳播疾病之一。國內(nèi)統(tǒng)計約占門診

        性病患者的40%。人類是淋病奈瑟菌唯一的宿主。在性關(guān)系紊亂情況

        下造成在人中的廣泛傳染及流行。臨床上多婁箐南現(xiàn)急性癥狀,少

        數(shù)為慢性過程。淋病奈瑟菌的檢查首先采用涂片法,發(fā)宮頸管內(nèi)分泌

        物涂片的陽性率最高,為100%;上1/3部分為84%;口處

        為35%。一般需將宮頸表面膿液試去,用棉拭子插入宮頸管1厘米深

        處停留10-30s,旋轉(zhuǎn)一周取出,將分泌生在玻片上,革蘭氏染后

        油鏡檢查,找革蘭氏性雙球菌,形似腎或咖啡豆?fàn)?,凹面相對?/p>

        除散在于白細(xì)胞之間外,還可見其被吞噬于中性粒細(xì)胞胞質(zhì)之內(nèi),因

        淋病奈瑟菌對各種理化因子抵抗力弱,涂片法可被漏診,必要時可進(jìn)

        行淋病奈瑟菌培養(yǎng),且有利于菌株分型和藥過敏試驗。近年來采用單

        克隆抗體技術(shù)生產(chǎn)的淋病抗血清,可與受檢查者宮頸分泌物中的淋病

        奈瑟菌結(jié)合,采用免疫熒光技術(shù),在30分鐘內(nèi)即可準(zhǔn)確得出結(jié)果。

        比培養(yǎng)法快,比涂片支準(zhǔn)確,較易掌握。此外運用PCR技術(shù)也可對

        淋病奈瑟菌過少,雜菌過多的標(biāo)本進(jìn)行診斷。

        對于淋病非顯性感染者,其淋病奈瑟菌的鏡檢出和培養(yǎng)檢查常為陰

        性,但卻是淋病的重要傳染源。為此,近年來制備了多種檢測淋病奈

        瑟菌的基因探針。大部分淋病奈瑟菌內(nèi)含有多拷貝的4。2kb隱蔽性

        質(zhì)粒,此外淋病奈瑟菌青毒素抗性主要是由編碼β-骨酰胺酶的質(zhì)粒

        決定的,用這兩種質(zhì)粒標(biāo)記的探針與分泌物進(jìn)行斑點雜交可分別

        探測淋病奈瑟菌及其抗藥性。其特異性敏感性均很高。目前還制備出

        淋病奈瑟菌DNA探針、菌毛探針和RNA探針,也建立了各種特異

        性高,敏感性強(qiáng)、簡便快速的右面放射性標(biāo)記的檢測系統(tǒng),成為淋病

        奈瑟菌及其抗藥性檢查的重要方法。

        (四)加德鈉菌

        加德鈉菌(Gardherellavaginalis;GV)和某些厭氧菌共同引起的細(xì)

        菌性病亦屬于性傳播疾病之一。該菌還能以非性行為方式傳播。

        除引起病外,尚可引起早產(chǎn)、產(chǎn)褥熱、新生兒敗血癥、絨毛膜羊

        膜炎、不后敗血癥和膿毒血癥等。加德鈉菌產(chǎn)生高濃度的丙酮酸

        的氨基酸,可被厭氧菌脫羧基生成相應(yīng)的胺,引起皮膚粘膜過

        敏。血管通透性增加,上皮細(xì)胞脫落,分泌物呈奶油狀大量排出,

        有惡臭?;颊叻置谖锔锾m氏染后可見性或染不定有時可

        染成革蘭氏陽性的小桿菌。大小為(1.5-2.5)μm×0.5μm,具有多形

        性,呈桿狀或球桿狀,分泌物PH常大小4.5,胺試驗陽性。

        除對加德鈉菌形態(tài)學(xué)鑒別外,還可進(jìn)行菌檢查,由于細(xì)菌

        性貌岸然病時酸桿菌減少,加德鈉氏菌的厭氧菌增加,可計算

        酸桿菌和加德鈉菌的數(shù)量變化,作為本病診斷參考。一般取分

        泌物涂片,革蘭氏染,用油鏡觀察3-5個視野,計算各種菌的數(shù)量。

        酸性桿菌為革蘭氏陽性大桿菌,(1-5)μm×1μm,常成雙,單根、

        鏈狀或柵狀排列,非細(xì)菌性病酸桿菌>5個/油視野僅見少許

        加德鈉菌。細(xì)菌性病不僅可見到加德鈉菌,還有其它革蘭氏陰性

        或陽性桿菌,無酸桿菌或小于5個/油鏡視野。

        尋找分泌物中的線索細(xì)胞,是診斷加德鈉菌性貌岸然病的重

        要指標(biāo)。線索細(xì)胞為鱗狀上皮細(xì)胞粘附多數(shù)加德鈉菌所致生理鹽

        水涂片可見該細(xì)胞邊緣呈現(xiàn)鋸齒狀。細(xì)胞已有溶解,核模糊不清,其

        上附著大量加德鈉菌及厭氧菌,使其表面毛糙,有斑點和大量的細(xì)小

        顆粒,亦右用吖啶橙染法或相差顯微鏡觀察法檢查線索細(xì)胞。此外

        還可用培養(yǎng)、熒光板、氣-液譜分析和PCR方法等助診。

        (五)衣原體

        泌尿生殖道沙眼衣原體感染是目前很常見的性傳播疾病之一,國外報

        道生殖道感染率為10。8%,由于感染后無特異癥狀,易造成該病流

        行,引起子性急性炎和宮頸炎。及原體感染的白帶膿性粘液,與

        細(xì)菌感染的膿性白帶不同。取膿性分泌物涂片,吉姆薩染,有進(jìn)時

        可見到細(xì)胞內(nèi)包涵體,但陽性率很低。過去采用傳統(tǒng)的組織培養(yǎng)分離

        衣原體的方法,技術(shù)難度大,特異性敏感性均不理想,且費時費錢。

        目前應(yīng)用較多的是熒光標(biāo)記的單克隆抗體的直接熒光抗體法,可快速

        確定系何種血清型衣原體敏感。80年代發(fā)民展的DNA探針技術(shù),可

        將分泌物經(jīng)PBS稀解,離心后沉淀物經(jīng)蛋白求恩酶K水解,酚/

        氯仿抽提等處理后與沙眼衣原體探針,如外膜蛋白基因的高度保守序

        列,或TE-55DNA探針等進(jìn)行斑點雜交,可檢出沙眼衣原體的15個

        血清型,而與其它細(xì)菌,病毒、立克次體等無交叉反應(yīng),敏感性和特

        異性均為95%左右。DNA探針方法對泌尿生殖道衣原體疾病的診斷、

        流行病學(xué)調(diào)查和無癥狀衣原體攜帶者的診斷很有意義。

        (六)病毒

        在人類性傳播疾病中有相當(dāng)一部分是由病毒引起的??蓮姆置谖?/p>

        中檢測的病毒有:

        單純皰疹病毒(herpessimplexvirus,HSV)

        有二個血清型,HSV-I和HSV-Ⅱ型。引起的生殖道感染的以Ⅱ型為

        主,約占85%。表南為生殖器官皰疹,潰瘍并通過胎盤引起胎兒感染,

        發(fā)生死胎、流主和畸形。實驗診斷多取病損處分泌物涂片進(jìn)生細(xì)胞學(xué)

        檢測、病毒培養(yǎng)或熒光抗體檢測。在孕期感染的監(jiān)測中,可采取宮頸

        部位分泌物做包涵體檢查。單純皰疹病毒以侵犯軍團(tuán)頸鱗狀上皮多

        見。感染早期細(xì)胞輕度或中度增大,核呈嗜堿性不透明的勻質(zhì)狀毛玻

        璃樣外觀,偶伴有核空泡化。由于核的增殖與胞質(zhì)腫大而形成多核或

        巨大細(xì)胞。感染晚期可發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核內(nèi)有嗜伊紅包涵體,周圍有透明暈,

        由于分泌物檢查陽性率低,病毒培養(yǎng)操作復(fù)雜費時,近年來對

        HSV的檢查主要采用熒光抗體檢查或分子生物方法診斷,特別是利

        用HSV基因組異性強(qiáng)的DNA片段棗HSV-I和HSV-Ⅱ,胸腺激

        酶的寡核苷酸探針和RNA探針進(jìn)行分子雜交,可快速而靈敏地對

        HSV感染作出診斷。

        人巨細(xì)胞病毒(humancytmegalovirus,HCMV)

        是先天感染的主要病原。一次感染后終年潛伏于體內(nèi),在機(jī)體免疫力

        低下時病毒激活,可表現(xiàn)為巨細(xì)胞包涵體病。孕期胎兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)

        受到侵犯可致小頭畸形、智力低下、視聽障礙等后遺癥。故孕婦

        分泌物巨細(xì)胞病毒檢查對孕期監(jiān)測尤其是重要的,常用宮頸拭子采取

        分泌物送檢。HCMV實驗室診斷方法除傳播病毒離法外,光鏡檢測

        包涵體陽性就緒極低,電鏡可直直接見到典型的皰疹病毒類形態(tài)結(jié)

        構(gòu),但無特異性,目前可采用CC-ABC法,即將標(biāo)本接種于人胚肺

        成纖維細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞,使病毒在敏感細(xì)胞中增殖,培養(yǎng)2天后收獲,

        再用針對HCMV早期抗原的單克隆抗體,利用生物素親和素放大作

        用染鑒定。亦可用HCMV、DNA片段或RNA探針與樣品進(jìn)行斑

        點雜交,夾心雜交或PCR后勤部的分子雜交來檢測,臨床最常用的

        方法是用ELISA法檢測孕婦血清HCMV-IGM來診斷活動性感染。

        人頭狀病毒(humanpapillomavirus,HPV)

        HPV目前鑒別有50余型。引起婦性生殖道感染的有23型,其中最

        主要的有6,11,16,18,31,33,型。HPV感染細(xì)胞后細(xì)胞的作用

        的主要表現(xiàn)為:①增殖感染,即病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制,產(chǎn)生感染子

        代致使細(xì)胞死亡。②細(xì)胞轉(zhuǎn)化,引起腫瘤發(fā)生,主要是引起生殖道鱗

        狀上皮肉瘤樣變,如16,18,31,33,35,29,型,尤其是宮頸癌

        患者以檢查出16,18型為多見。HPV檢測亦可采用傳統(tǒng)的病毒培養(yǎng)、

        分泌物涂片、光鏡檢測。HE染可見核周空暈?!皻馇驑印辈《靖腥?/p>

        空泡細(xì)胞,但陽性率很低。下生殖道疣狀贅生物者常可進(jìn)行病理學(xué)鏡

        可電鏡檢查,可崢到典型的病毒感染細(xì)胞或閏毒顆粒。目前常采用

        ABC法以兔抗HPV為一抗,生物素標(biāo)記的羊抗兔IGG為二抗檢測病

        毒抗原?;虿捎貌《鞠鄳?yīng)的寡核苷酸探針,與分泌物中提取的

        DNA進(jìn)行斑點雜交或夾心雜交進(jìn)行檢測。如采用PCR技術(shù)則可檢測

        極微量的HPV(即106個細(xì)胞中有一個感染細(xì)胞)

        分泌物檢查臨床操作

        適應(yīng)證

        1.分泌物檢查主要用于常見炎的鑒別診斷,常見的炎有

        滴蟲炎、外陰念珠菌病及細(xì)菌性病。主要有懸滴法、pH

        測定和培養(yǎng)法。懸滴法及培養(yǎng)法用于檢測三種常見炎的病原體;

        pH測定是根據(jù)三者的病原體不同、分泌物的pH不同,來檢測

        分泌物的pH值。

        2.培養(yǎng)法主要用于:①臨床高度懷疑滴蟲炎或外陰念珠菌

        病,但懸滴法檢測滴蟲或念珠菌陰性;②臨床已診斷滴蟲炎或外

        陰念珠菌病,但經(jīng)過抗滴蟲治療或抗真菌治療,療效不佳,考慮

        有耐藥發(fā)生。此外,復(fù)發(fā)性外陰念珠菌病考慮有非白念珠菌感染

        的可能時,均應(yīng)做分泌物培養(yǎng),確定病原體。

        禁忌證

        出血期間禁作此項檢查。

        準(zhǔn)備

        1.生理鹽水或10%氫氧化鉀。

        2.玻片、刮板。

        3.備窺器、無菌手套。

        方法

        1.懸滴法

        (1)方法:懸滴法也稱濕片法,有生理鹽水懸滴法及10%氫氧化鉀

        懸滴法。前者用于檢測滴蟲及線索細(xì)胞,后者用于檢測念珠菌的芽胞

        及假菌絲。將1~2滴生理鹽水及10%氫氧化鉀分別放在兩張玻片上,

        取上1/3處的分泌物(或內(nèi)典型分泌物)分別與玻片上的生

        理鹽水或10%氫氧化鉀混合,然后在顯微鏡下進(jìn)行檢查。

        (2)診斷標(biāo)準(zhǔn):在生理鹽水的濕片上見到呈波狀運動的滴蟲及增多

        的白細(xì)胞,即可診斷滴蟲炎。在10%氫氧化鉀的濕片上見到芽胞

        及假菌絲可診斷為外陰念珠菌病。在生理鹽水的濕片上見到線索

        細(xì)胞,結(jié)合分泌物的其他特點,如白、均質(zhì)的分泌物,胺試驗陽性,

        pH>4.5,則可診斷細(xì)菌性病。

        測定

        (1)方法:pH測定主要采用精密pH試紙(4~7)測定分泌

        物的pH值。

        (2)診斷標(biāo)準(zhǔn):滴蟲炎的分泌物pH>4.5。外陰念珠

        菌病的pH<4.5,若pH>4.5,提示有混合感染,如同時有滴蟲感染

        等。細(xì)菌性病應(yīng)pH>4.5。

        3.培養(yǎng)法

        (1)滴蟲培養(yǎng):取分泌物放在肝浸湯培養(yǎng)基或大豆蛋白胨培養(yǎng)

        基中,37℃孵育48h后鏡檢有無滴蟲生長。

        (2)念珠菌培養(yǎng):取分泌物放在TTC沙保羅(Sabouraud)培

        養(yǎng)基上,置濕溫或37℃溫箱,3~4d后出現(xiàn)菌落。若菌落為白,

        有可能為白念珠菌,若為紅、紫紅等其他顏可能為非白念珠菌。

        若進(jìn)一步對白念珠菌及非白念珠菌進(jìn)行菌種鑒定,需在玉米-吐溫培

        養(yǎng)基上進(jìn)一步培養(yǎng),25℃培養(yǎng)72h,顯微鏡下有假菌絲,中隔部伴有

        成簇的圓形分生孢子,頂端有厚壁的后膜孢子,芽管試驗陽性,即為

        白念珠菌。不符合以上特征的即為非白念珠菌。其他非白念珠菌的菌

        株鑒定,須通過糖發(fā)酵及糖同化試驗進(jìn)一步鑒定。

        無癥狀時不應(yīng)做培養(yǎng)。

        注意事項

        做懸滴法檢查時,注意取分泌物前24~48h避免、灌洗或局

        部用藥,取分泌物時窺器不涂潤滑劑,分泌物取出后應(yīng)及時送檢,若

        懷疑滴蟲,應(yīng)注意保暖,尤其冬日,否則滴蟲活動力減弱,造成辨認(rèn)

        困難。

        鄭重聲明:本文版權(quán)歸原作者所有,轉(zhuǎn)載文章僅為傳播更多信息之目的,如有侵權(quán)行為,請第一時間聯(lián)系我們修改或刪除,多謝。

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