改善古生物基因組學(xué)
脆弱的DNA分子容易受到損害,并且隨著時(shí)間的推移會(huì)被不相關(guān)的DNA污染。DNA序列的標(biāo)準(zhǔn)方法是首先擴(kuò)增微小的DNA樣本。然而,從未經(jīng)過保存的DNA樣品中提取的古老的DNA 1通常難以測(cè)序,因?yàn)樗呀?jīng)屈服于這些侮辱。
由丹麥哥本哈根大學(xué)Ludovic Orlando領(lǐng)導(dǎo)的國(guó)際研究團(tuán)隊(duì),包括沙特阿拉伯沙特國(guó)王沙特大學(xué)的Khaled Al-Rasheid,報(bào)道了古??老DNA的第一個(gè)真正的單分子測(cè)序。
真正的單分子測(cè)序(tSMS)是一種繞過DNA擴(kuò)增的最先進(jìn)技術(shù)。它允許對(duì)單鏈DNA進(jìn)行測(cè)序,這使得它比標(biāo)準(zhǔn)方法更快。
奧蘭多和他的同事們從永久凍土中保存的馬骨中采集了DNA樣本超過5萬年,并使用tSMS生成了115.9兆堿基。他們?cè)诨蚪M研究中發(fā)表了他們的發(fā)現(xiàn) 。
然后,該團(tuán)隊(duì)采用標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序方法從相同樣品中產(chǎn)生76.9兆堿基,并比較兩種技術(shù)產(chǎn)生的序列。
他們證實(shí)標(biāo)準(zhǔn)方法可以從古代DNA中產(chǎn)生可靠的序列,但是用tSMS獲得了更高的序列產(chǎn)量,因?yàn)檫@種方法特別適合于對(duì)極短片段進(jìn)行測(cè)序。
研究人員對(duì)tSMS方案進(jìn)行了簡(jiǎn)單的修改,使馬DNA的比例增加了三倍,從而污染了DNA。
化石骨的某些部分比其他部分含有更多的DNA,并且在采集了幾個(gè)不同的樣本后,該團(tuán)隊(duì)能夠識(shí)別富含DNA的利基。這可以使未來研究中更容易從化石骨骼中提取更多古老的DNA。
研究人員建議,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)和尖端技術(shù),每種技術(shù)都針對(duì)單個(gè)樣品的特性進(jìn)行定制,這將使古代DNA樣品的測(cè)序具有前所未有的準(zhǔn)確性。
“我們可以進(jìn)一步改善古代DNA的tSMS,”Ludovic說,“通過利用酶處理來獲取當(dāng)前協(xié)議遺漏的分子。”
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