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ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２?２３０２．２００９．０４．０２０?綜述?

幽門螺桿菌的臨床診斷進展

周治中王麗梅木

幽門螺桿菌（Ｈｅｌｉｅｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ）為上消化道

疾病的重要致病因子，與胃竇炎、胃潰瘍、胃腺癌

及胃黏膜相關Ｂ細胞淋巴瘤的發(fā)生均有密切的關

系。及早進行Ｈｐ診斷，明確是否伴有Ｕｐ感染，

對防治上消化道疾病有重要意義。目前，臨床檢測

Ｈｐ的方法有多種，主要分為侵入性和非侵人性兩

大類，各有其優(yōu)缺點，適用于不同的臨床情況?，F

對上述方法及研究進展綜述如下。

一、侵人陛診斷

需借助胃鏡取胃黏膜活檢標本，再行Ｈｐ病原

學或相關指標檢測。標本采取的部位也影響檢測結

果的準確。

１．細菌培養(yǎng)

從患者的胃黏膜組織中成功分離培養(yǎng)出Ｈｐ，

是診斷Ｈｐ的“金標準”，并可進行后續(xù)的細菌藥

敏和耐藥性實驗，對不同菌株做遺傳學研究。

Ｈｐ的生長條件非?？量蹋线m的培養(yǎng)基及培

養(yǎng)條件對于成功培養(yǎng)Ｈｐ至關重要。需要注意的是

培養(yǎng)時間延長，培養(yǎng)基水份、營養(yǎng)成分損失，空氣

中放置時間過長、氣體溫度條件不適、抗生素作用

等因素均易使培養(yǎng)中的Ｈｐ發(fā)生變異，菌體從彎曲

桿菌變?yōu)榍蛐?、絲狀型而呈非可培養(yǎng)或難于再培養(yǎng)

的狀態(tài)¨Ｊ。

Ｈｐ培養(yǎng)的成功還與樣品的正確采集和樣品采

集后的及時處理有直接關系。近期未使用抗Ｈｐ藥

物患者可于胃竇部取樣，而使用抗Ｈｐ藥物患者同

時于胃底、胃體黏膜潰瘍、隆起糜爛性病灶部位采

樣［２】。可在胃鏡下噴灑尿素．酚紅混合液后以素

基金項目：國家自然科學基金資助項目（項目編號：

３０８０１０５５、

作者單位：７１００３２西安，第四軍醫(yī)大學基礎部微生物

學教研室。?通訊作者

萬方數據

胃鏡檢查，通過觀察胃黏膜變情況，了解Ｈｐ感

染的分布范圍、密度、類型（彌漫性或斑片性），

避免盲目活檢。但是，在菌量少、尿素酶活性不強

等情況下，酚紅顯不顯著可影響觀察舊Ｊ。樣本

采集后，應立即進行細菌培養(yǎng)或隔絕空氣濕潤低溫

保存于介質中，并于３ｈ內接種。

由于Ｈｐ的細菌培養(yǎng)是Ｈｐ診斷試驗中技術要

求最高的一種方法，有時有假陰性出現，因此不適

于在基層醫(yī)院推廣。

２．組織切片染

組織切片染可直接觀察Ｈｐ，有極高的特異

性和敏感性，同時可明確胃部病變性質。其方法很

多，最常用的有改良Ｇｉｅｍｓａ染、Ｗａｒｔｈｉｎ—Ｓｔａｒｙ

銀染及甲苯胺藍染。相比較而言，Ｗａｒｔｈｉｎ?

Ｓｔａｒｙ銀染在組織切片染中效果最好，但操作

繁瑣、花費昂貴、技術要求熟練程度高，難以在一

般條件醫(yī)院普及。甲苯胺藍染操作簡便、省時，

對Ｈｐ有較強親和力，可采用稍過染、深分化的退

行性染法，加大Ｈｐ與背景的差，使之更易與

組織碎片、污染菌及其它雜菌相區(qū)別，值得在臨床

病檢中推廣應用幢ｊ。

３．聚合酶鏈反應（ＰｅＲ）檢測

ＰＣＲ具有快速、敏感、特異的優(yōu)點，對胃黏

膜標本的要求較低，適用于標本中Ｈｐ含量過少或

因含大量正常菌而降低Ｈｐ培養(yǎng)敏感性時Ｈｐ的

檢測，還可用于對Ｈｐ進行分型鑒定。常用的引物

主要有來源于尿素酶基因（ｕｒｅＡ）、１６ｓｒＲＮＡ基

因、２３ｓｒＲＮＡ基因、磷酸葡萄糖氨基轉移酶基因

（ｕｒｅＣ）、細胞毒素相關基因（ｖａｅＡ、ｃａｇＡ）等，

其中前兩種基因的檢測應用最為廣泛【３’４Ｊ。

ＰＣＲ檢測在操作過程中極易受到污染，因此

對于胃鏡、活檢通道、活檢鉗的洗滌、消毒以及實

驗操作的要求都十分嚴格。目前，實時熒光ＰＣＲ

熱堂痘皇壹生蟲堂２Ｑ塑生箜２鲞筮生翅』鯉堡型叢！塑巳ｉ趔墮翌墅塑墊魚№?。椋。。?！趕至Ｑ塑：ｙ旦?。冢簠玻驯ぁ玻矗?

能夠有效控制ＰＣＲ產物的實驗室污染，更適合于

實驗室常規(guī)檢測。由于根除治療后殘存胃中的Ｈｐ

ＤＮＡ亦可能被ＰＣＲ擴增而出現假陽性，因此，

ＰＣＲ不宜用來判斷Ｈｐ治療的短期療效。

４．尿素酶試驗（ＲＵＴ）

ＲＵＴ是基于Ｈｐ可產生極強的尿素酶活性，而

建立的一套能夠較好的檢測Ｈｐ感染的方法，但該

法仍是一種需通過胃鏡取活檢的侵入性方法。尿素

酶分解尿素產生ＮＨ，和ＣＯ：，ＮＨ，的產生可使ｐＨ

值升高，胃黏膜組織呈堿性，據此原理可通過加入

ｐＨ指示劑通過顏的改變判斷有無Ｈｐ感染存在，

即尿素酶試驗法【５Ｊ。

目前已有多種尿素酶試劑盒或試紙可供臨床使

用，因其操作簡便、費用低、省時，在臨床中得到

廣泛使用，尤其適于基層醫(yī)療單位使用。但由于試

劑盒或試紙商品種類繁多，質量或觀察時間不同，

檢測結果差異較大。同時，檢測結果受標本內細菌

密度、“灶性分布”的影響，有一定假陰性率。此

外，萎縮性胃炎患者由于胃酸缺乏，其他產尿素酶

的細菌亦可在胃內生長，導致ＲＵＴ假陽性。如采

取多點活檢或結合細菌培養(yǎng)可望提高診斷的準確

性。

二、非侵入性診斷（需取胃液、血清、唾液、

糞便等標本）

１．尿素呼氣試驗（ＵＢＴ）

ＵＢＴ是目前應用最廣泛的檢測Ｈｐ的常規(guī)方

法，敏感性和特異性很高，均≥９５％，可定性定量

測定胃內Ｈｐ感染的總體情況，避免因活檢標本

Ｈｐ分布不均可能造成的假陰性結果，是目前被認

為除細菌培養(yǎng)之外診斷Ｈｐ感染的“金標準”。其

原理是Ｈｐ在體內產生尿素酶，用１３ｃ或１４Ｃ同位素

標記尿素口服后可被Ｈｐ產生的尿素酶分解，產

生¨ＣＯ：或ＨＣＯ：，通過從受檢者呼出氣體中檢測出

的１３Ｃ豐度或１４ｃ活性來判斷受檢者胃內Ｈｐ的感染

程度。此項檢測，臨床應用廣泛，不需做內鏡取標

本，技術要求低，缺點是費用高?！保愫停保矗愫魵庠?/p>

驗各有其優(yōu)缺點及不同的臨床應用范圍№?７１，具體

差異見表１。

萬方數據

表１１３Ｃ－ＵＢＴ和“Ｃ．ＵＢＴ的差異

３Ｃ．ＵＢＴ¨Ｃ．ＵＢＴ

放射性無

安全性好翥銷ｉ粼于孕有

測定方法氣體同位素質譜儀閃爍掃描儀

費用較貴，難以推廣較便宜，容易推廣

２．１５Ｎ一尿氨排出試驗

Ｈｐ尿素酶分解尿素生成ＣＯ：和ＮＨ，，后者經

吸收在肝臟代謝，從腎以氮、銨及尿素的形式排

出，因此口服含”Ｎ的尿素后，測定一定時間內尿

中１５Ｎ排出量，可判斷有無Ｈｐ感染Ｍ

Ｊ。該方法的

原理等同ＵＢＴ，無放射性、無創(chuàng)，敏感性和特異

性高。但需質聯(lián)用儀器，并且操作繁瑣，檢測結

果受機體代謝、吸收、排泄等眾多因素干擾。其臨

床診斷價值還有待研究。

３．胃液分析

胃液分析是檢測Ｈｐ的一種簡單、經濟和有效

的方法，同時可以提供相關臨床病理信息，輔助診

斷胃癌相關主要危險因子（如萎縮性胃炎）坤Ｊ。對

于內鏡檢查結果良好的患者，醫(yī)師往往忽略其相關

的后續(xù)檢查（ＲｕＴ和活檢），造成許多Ｈｐ感染者

以及泌酸黏膜相關性萎縮性胃炎（ＡＧＯＭ）患者的

漏診。研究表明，胃液ｐＨ的改變和胃液中銨鹽濃

聚物的含量與胃內Ｈｐ感染密切相關。Ｈｐ感染和

ＡＧＯＭ均可造成這兩種參數的改變。因此，在內鏡

檢查過程中，若能對胃液ｐＨ和銨鹽濃聚物的含量

測定，則可對Ｈｐ感染和ＡＧＯＭ進行較為準確的預

測，再選擇性地進行后續(xù)檢查，能夠有效防止Ｈｐ

感染者和ＡＧＯＭ患者的漏診。目前，已有一種新

裝置能夠連接到任何內鏡檢查設備上，在內鏡檢查

過程中，抽取胃液實時自動檢測其中銨鹽濃聚物含

量和ｐＨ，２ｒａｉｎ內即可完成胃液樣本的分析，臨床

診斷的可靠性已獲證實，Ｈｐ檢出率達到９８％。

４．Ｈｐ相關抗原、抗體的檢測

（１）血清學檢測：血清學檢測是一種極具潛力

的檢測手段，主要有ＥＬＩＳＡ、膠凝集試驗、

Ｗｅｓｔｅｒｎ

ｂｌｏｔｔｉｎｇ以及斑點金免疫滲濾試驗（ＤＩＦ－

ＧＡ）。選擇合適的抗原物質可以提高血清學檢測的

?２４２?越董痘皇壹生皇堂２Ｑ塑生筮２鲞筮壘翅』螋嬰查叢墅！巳ｉ型望ｉ！！墊壁！型￡皇堂迪！！毆蘭Ｑ塑：ｙ！?。。骸肀?/p>

準確性。張虹雨等【９１對感染Ｈｐ人檢測血清中

ＣａｇＡ、ＶａｃＡ、Ｕｒｅ、Ｈｓｐ６０、ＲｄｘＡ五種ＩｇＧ抗體后

得出結論：Ｕｒｅ免疫原性強，表達充分，其抗體可

作為Ｈｐ感染陽性的標志物；ｃ舭基因在Ｈｐ中呈

不完全分布，ＶａｃＡ蛋白在Ｈｐ中不完全表達，限

制了這兩種抗體單獨作為Ｈｐ感染陽性的標志物；

ｎｓｐ６０抗體水平對于Ｈｐ感染的檢測價值不大；

ＲｄｘＡ抗體水平不能標志甲硝唑耐藥的水平。同時，

在Ｈｐ感染初期抗體效價尚未上升時，血清學檢測

可呈假陰性；在Ｈｐ根除后血液中ＩｇＧ抗體水平可

維持半年，在臨床診斷過程中不能判斷是否是既往

感染。因此血清Ｈｐ抗體檢測不宜用于臨床診斷，

而更適用于Ｈｐ感染的流行病學調查，且應以Ｕｒｅ

抗體為主，ｃａｇＡ抗體和ＶａｃＡ抗體為輔。

（２）Ｈｐ糞便抗原檢測（ＨｐＳＡＴ）：該法簡單、

準確，敏感性達８０％一９５％，特異性達７５％一

１００％，目前認為應用前景良好，主要有酶免疫檢

測（ＥＬＩＳＡ）和ＨｐＳＡ免疫快檢卡¨０｜。ＥＬＩＳＡ檢測

中目前運用的抗體有多克隆抗體和單克隆抗體。多

克隆抗體在制備中缺乏特異性和統(tǒng)一性，難以保證

質量穩(wěn)定，且存在交叉反應，假陽性相對偏高；而

單克隆抗體相對可提高檢測的特異性和準確性。

ＨｐＳＡ免疫快檢卡則是一種基于橫向流動譜技

術，使用高效單克隆抗體快速免疫層析實驗檢測

Ｈｐ抗原的方法。其最大特點是操作簡便、快捷，

５ｍｉｎ后即可出結果，技術要求低，可在實驗室外

操作，但準確性不如ＥＬＩＳＡ。有報道，當待檢糞便

未及時于－２０＂Ｃ保存時，ＨｐＳＡＴ的敏感性和特異性

會有所降低¨¨。另外，取５歲以下小孩的新鮮糞

便進行ＨｐＳＡＴ，結果顯示敏感性僅僅為６５％，可

能是糞便中Ｈｐ濃集太低的緣故。與組織切片染

相比，在Ｈｐ根除治療后的診斷中，ＨｐＳＡＴ的準確

度較低，因而該方法一般用于初次診斷，而不適用

于治療后的復查。

（３）尿液抗Ｈｐ抗體的檢測：尿液樣本的采集

無創(chuàng)性，均一性好，細菌污染機會小。標本靜置片

刻，無需離，ｔ∑，ｅＰ可直接上樣檢測。但尿液中的免疫

球蛋白或其碎片含量極低，因此，檢測尿液抗體用

的包被抗原濃度通常是檢測血清抗體的２０倍，溫

萬方數據

育時間亦需延長ｌ倍。研究結果證明，檢測尿液抗

ＨｐＩｇＧ的準確性基本上與血清學檢測方法相同，

但易受高蛋白尿、飲水稀釋和ｐＨ變化等因素的影

響‘１２ｌ。

三、其他診斷方法

１．胃血素指數測定

有研究認為，當感染Ｈｐ而引起胃炎時，胃黏

膜血素濃度相關指數（ＩＨｂ）平均值會趨于高

值，而當Ｈｐ根除治療成功后，胃炎痊愈，ＩＨｂ平

均值則趨于低值。國內有研究顯示：Ｈｐ陽性慢性

胃炎患者ＩＨｂ值明顯高于Ｈｐ陰性慢性胃炎患者；

Ｈｐ根除成功患者ＩＨｂ值明顯低于根除治療前，而

根除Ｈｐ不成功患者ＩＨｂ值與根除治療前相比差別

不大，提示測定胃ＩＨｂ值對Ｈｐ感染和Ｈｐ根除治

療后評價是有價值的，但ＩＨｂ設定值為多少對Ｈｐ

感染診斷還需進一步研究¨３｜。

２．放大內鏡檢查

常規(guī)胃鏡檢查Ｈｐ相關性胃炎表現為黏膜充

血、水腫、糜爛及黏膜結節(jié)樣病變，但缺乏特異

性。放大內鏡在放大倍數及圖像清晰度方面都有明

顯改進，可以很好地對正常胃黏膜和Ｈｐ相關性病

變胃黏膜進行鑒定¨４Ｉ。

胃竇結節(jié)被公認為是Ｈｐ相關性胃炎的特征，

在５７．１％的未發(fā)生胃潰瘍的Ｈｐ感染者中和１００％

的未發(fā)生十二指腸潰瘍的Ｈｐ感染者中均有發(fā)現，

而且在和兒童中有較高的陽性預測值和較好的

重復性。胃竇表面異常紋理、胃竇浸蝕以及胃體表

面頭狀突起這三種內鏡特征也被認為與Ｈｐ相關

性胃炎有關。其中，胃體表面頭狀突起對于Ｈｐ

相關性胃炎診斷的陽性預測值最高（７０％）。而對

于胃竇浸蝕的檢測，其靈敏度較低，特異性較高。

無Ｈｐ感染的正常胃體黏膜表現為規(guī)則分布的集合

靜脈，是Ｈｐ陰性胃體黏膜的特征性圖像。而Ｈｐ

相關性病變胃黏膜由于胃黏膜細胞發(fā)生炎癥而使集

合靜脈觀察不清楚。研究表明，當放大內鏡檢查存

在特征性圖像且不存在胃竇結節(jié)時，預測胃黏膜未

受Ｈｐ感染的準確度可達９９．３％。據此，通過放大

內鏡判斷胃黏膜感染Ｈｐ與否相對來說是足夠的，

無需進行后續(xù)檢測，但一定程度上受制于個人主觀

墊堂痘皇壹生蜜堂２Ｑ鯉璽筮Ｚ鲞筮壘翅』些望世塹！業(yè)ｉ竺型堡！絲！塑墊魚￡墅笪絲Ｑ毆呈鯉竺：Ｙ生２：塑２壘。２４３?

判斷。另有研究表明，炎癥細胞浸潤、胃黏膜上皮

表面退化甚至微血管破裂等病變都能導致集合靜脈

的消失；在Ｈｐ根除治療后三年內，患者可依舊存

在胃竇結節(jié)，且特征性圖像不明顯。所以，通過放

大內鏡檢查不適用于對近期接受治療的患者進行

Ｈｐ感染評價。目前，放大內鏡檢查技術提高了診

斷的準確性，并且能夠檢測Ｈｐ相關性胃炎的其它

癥狀（如胃萎縮和胃上皮化生）ｕ５１。

３．窄頻帶成像（ＮＢＩ）

ＮＢＩ是近年來發(fā)展起來的一種新技術，其工作

原理與常規(guī)影像內窺鏡系統(tǒng)類似，不同的是在現有

的紅一綠一藍濾光器技術的基礎上，采用更窄頻帶的

紅一綠一藍濾光器以提高分辨率，與內窺鏡放大檢查

聯(lián)用可以更準確的提供并區(qū)分胃黏膜及其血管模式

的圖像¨６Ｉ，發(fā)現常規(guī)內窺鏡檢查易忽略的胃黏膜

細小損傷，為早期診斷出胃腺癌和定向獲取活檢標

本提供幫助。由于ＮＢＩ主要受毛細血管內血紅蛋

白對光的吸收的影響，亦可清楚區(qū)分胃體和胃竇處

黏膜及其血管模式的差異。正常人胃組織的ＮＢＩ

顯示，胃內毛細血管網分布規(guī)則，而Ｈｐ感染者胃

組織的毛細血管網分布密度減少，胃黏膜圖像不規(guī)

則，可能是由于Ｈｐ感染引起顯著的水腫炎癥而使

得圖像模糊，也可能是因為慢性Ｈｐ胃炎所致。

ＮＢＩ檢測Ｈｐ感染者以毛細血管網分布密度減少為

主要特征的不規(guī)則胃黏膜圖像的敏感性為７５％，

特異性為８８％，但不能區(qū)分正常的和伴有輕度胃

炎的胃黏膜圖像。隨著該技術的不斷發(fā)展，有望用

于胃腺癌、食道癌以及結腸息肉患者的早期、有效

診斷。

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（收稿日期２００９－０６．１６

編輯李啟揚）