時珍國醫(yī)國藥２０１３年第２４卷第２期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ?。停牛模桑茫桑危拧。粒危摹。停粒裕牛遥桑痢。停牛模桑茫痢。遥牛樱牛粒遥茫取。玻埃保场。郑希蹋玻础。危希病?/p>

脾陽虛大鼠下丘腦星形膠質細胞ＧＦＡＰ和小膠質細胞　

０Ｘ４２的表達及大建中湯的干預作用　

王　慧，武靜，陳繼婷　

５５０００２）?。ㄙF陽中醫(yī)學院基礎醫(yī)學院，貴州貴陽

摘要：目的觀察脾陽虛癥大鼠下丘腦星形膠質細胞和小膠質細胞表達的改變，以及大建中湯對脾陽虛大鼠下丘腦星形　

膠質細胞和小膠質細胞表達的影響，探討下丘腦神經(jīng)膠質細胞在脾陽虛癥發(fā)病機制中的作用和大建中湯可能的作用環(huán)　

節(jié)。方法采用飲食失節(jié)傷脾氣，勞倦過度傷脾氣及苦寒瀉下傷脾陽的方法，建立脾陽虛模型。實驗分為正常對照組，?！?/p>

型組，大建中湯治療組。采用免疫組織化學染法對下丘腦膠質原纖維酸性蛋白（ＧＦＡＰ）和特異性標記小膠質細胞的　

０Ｘ４２抗體進行染，觀察與內臟活動密切相關的下丘腦組織中星形膠質細胞ＧＦＡＰ和小膠質細胞０Ｘ４２表達的變化。　

結果與正常對照組相比，脾陽虛模型組大鼠下丘腦ＧＦＡＰ與０Ｘ４２表達增強，陽性細胞數(shù)增多，差異具有統(tǒng)計學意義（Ｐ　

＜０．０１）；大建中湯高劑量組ＧＦＡＰ與０Ｘ４２表達與模型組相比明顯下降，具有顯著性差異（Ｐ＜０．０１）。結論脾陽虛能激　

活下丘腦星形膠質細胞和小膠質細胞，膠質細胞的激活可能是脾陽虛癥大鼠模型形成的神經(jīng)機制之一，大建中湯可能通　

過作用于神經(jīng)膠質細胞來達到其干預脾陽虛癥的作用?！?/p>

關鍵詞：大建中湯；脾陽虛；下丘腦；膠質細胞　

Ｄ０Ｉ標識：ｄｏｉ：１０．３９６９／ｉ．ｉｓｓｎ．１００８－０８０５．２０１３．０２．０２２　

中圖分類號：Ｒ２８５．５　文獻標識碼：Ａ　文章編號：１００８－０８０５（２０１３）０２－０３０４－０２　

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Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｄａｊｉａｎｚｈｏｎｇ?。洌澹悖铮悖簦椋铮睿弧。樱穑欤澹澹睿伲幔睿纭。模澹椋妫悖椋澹睿悖?；Ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓ；?。牵欤椋帷。悖澹欤臁?/p>

脾陽虛是指脾陽虛衰、失于溫運、陰寒內生所表現(xiàn)的虛寒癥　陽虛證發(fā)病中的作用，探討大建中湯可能的作用環(huán)節(jié)?！?/p>

候，由于脾主運化異常，導致相關消化系統(tǒng)功能紊亂，進而出現(xiàn)消?。辈牧吓c儀器　

化不良癥狀的病理狀態(tài)。臨床表現(xiàn)為畏寒、肢冷、乏力、消瘦、腹?。保眲游锛胺纸M健康成年清潔級ＳＤ雄性大鼠２８只，體質量　

許可證號ＳＣＸＫ　

痛、便溏及腹瀉等。大建中湯出自《金匱要略》，是臨床治療脾胃　

２００～２２０ｇ（由重慶騰鑫生物技術有限公司提供，

２００７—０００８。置于安靜，溫度保持恒定（２２±２）℃，避免強　

虛寒癥的常用方劑，臨床療效確切。目前對脾陽虛癥的研究較多　

（渝）

集中在能量代謝、胃腸功能活動、血液中有關化學物質改變等方　光的環(huán)境中飼養(yǎng)３?。?。隨機分為①正常對照組；②模型組；③大建　

按灌胃劑量分為兩個劑量組，即大劑量組、小劑量　

面，脾陽虛癥對神經(jīng)系統(tǒng)作用的研究較少。下丘腦是對各種內臟　

中湯治療組：

功能進行整合的較高級中樞，脾陽虛是否能影響下丘腦的神經(jīng)活　

組，以上每組７只。

ｙｍｐｕｓ，Ｊａｐａｎ），ＧＦＡＰ　

動非常值得探討。神經(jīng)膠質細胞是組成神經(jīng)系統(tǒng)數(shù)量最多的一　

１．２器材、試劑與藥物ＢＸ一４１顯微鏡（Ｏｌ

ｎｇ　Ｋｏｎｇ），二步法免　

種細胞，研究表明神經(jīng)膠質細胞激活后可釋放多種化學物質，參　

（北京博奧森有限公司），０Ｘ４２（ａｂｃａｍ，Ｈｏ

ＰＶ一６００２），　

與多種復雜的神經(jīng)系統(tǒng)功能…。本研究擬復制脾陽虛大鼠?！?/p>

疫組化試劑盒（北京中杉金橋公司產(chǎn)，ＰＶ一６００１、

型，觀察與內臟活動密切相關的下丘腦組織中星形膠質細胞　

ＤＡＢ顯劑（北京博奧森有限公司）。中藥材均購自貴陽同濟堂　

經(jīng)貴陽中醫(yī)學院方藥教研室汪毅教授鑒定為正品。造?！?/p>

ＧＦＡＰ和小膠質細胞０Ｘ４２的表達變化，探討神經(jīng)膠質細胞在脾　

大藥店，

用番瀉葉水浸液制備：將番瀉葉按１：１比例與水混合，于恒溫水　

浴箱中７０％浸泡２４?。瑁瑢⒔靡河茫硨蛹啿歼^濾后在４℃冰箱中　

收稿日期：２０１２　１０－２７；修訂日期：２０１２－１１－２６　

保存?zhèn)溆?。治療用藥大建中湯的制備：蜀椒（炒去汗）：干姜：?/p>

基金項目：貴州省自然科學基金資助（黔科合Ｊ字［２０１０］２１９２號）　

人參：飴糖（烊化）＝１：２：１：５，制備方法參照文獻　，分別制　

作者簡介：王慧（１９６７一），女（漢族），貴州貴陽人，現(xiàn)任貴陽中醫(yī)學院基　

成大劑量（含生藥１．５ｇ／ｍ１）、小劑量（含生藥０．３７５ｇ／ｍ１）兩種濃　

礎醫(yī)學院副教授，博士學位，主要從事中西醫(yī)結合基礎研究工作．　

通訊作者簡介：陳繼婷（１９５２一），女（漢族），江蘇南京人，現(xiàn)任貴陽中醫(yī)　

度水煎液。

學院基礎醫(yī)學院教授，碩士學位，主要從事《金匱要略》方證的實驗和臨床　

２方法　

２．１　造模根據(jù)我們以往實驗的造模方法加以改進，造模過程分　

應用研究工作．　

．３０４?