萬方數(shù)據(jù)

揚州大學(xué)烹飪學(xué)報２００６（３）：２３－－２５

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荷葉黃酮和生物堿的提純及調(diào)節(jié)血脂作用比較

黃阿根‘，施洪飛２，韋紅‘，董瑞建‘，周文娟‘

（１．揚州大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，江蘇揚州２２５００１；　２．揚州大學(xué)體育學(xué)院，江蘇揚州２２５００１）

摘要：荷葉有較好的調(diào)節(jié)血脂功效，其主要活性組分是生物堿和黃酮類化合物，但它們各自在調(diào)節(jié)血脂中

作用并不清楚，通過對荷葉黃酮和生物堿提取、分離和純化，并用兩分離組分進(jìn)行大鼠動物實驗，比較它們的

調(diào)節(jié)血脂功效。結(jié)果表明：荷葉浸膏、荷葉生物堿時調(diào)節(jié)血脂中甘油三醋（ＴＧ）的指標(biāo)有極顯著作用，荷葉黃

酮對調(diào)節(jié)血脂中甘油三醋的有顯著作用，同樣劑量生藥提煉的生物堿明顯優(yōu)于荷葉黃酮的降血脂功效。

關(guān)鍵詞：荷葉；黃酮；生物堿；調(diào)節(jié)血脂

中圖分類號：Ｒ　１５１．３文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ文章編號：１００９一４７１７（２００６）０３一００２３一０３

荷葉是既可藥用又可食用的資源，具有良好的調(diào)節(jié)血脂功效，為許多研究報道所證實

，但其功效因

子不明確，一般認(rèn)為其主要有效成分是生物堿和黃酮類化合物〔１－４１。而將單味荷葉黃酮

、生物堿進(jìn)行

分離純化，比較它們的調(diào)節(jié)血脂功效，未見報道。本文通過對荷葉黃酮、生物堿進(jìn)行提取分離純化得到

較純的黃酮、生物堿，并對它們進(jìn)行大鼠功能實驗，以比較荷葉黃酮、生物堿在調(diào)節(jié)血脂方面發(fā)揮的功能

作用，為有效開發(fā)利用荷葉提供理論依據(jù)。

１實驗材料和方法

１．１實驗材料

１．１．１供試品由本實驗室制備；荷葉浸膏（（１　ｍｇ相當(dāng)于生藥１０．１１?。恚纾?；荷葉黃酮（１?。恚缦喈?dāng)于生藥

８０．?。埃啊。恚纾缓扇~生物堿（１?。恚缦喈?dāng)于生藥７９０　ｍｇ）．

１．１．２動物ＳＤ雄性大鼠，購自上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司仁ＳＣＸＫ（滬２００３?。埃埃埃常荩?/p>

１．１．３藥品及試劑血脂康膠囊，北京北大維信生物科技有限公司出品（批號Ｚ１０９５００２９）。甘油三醋

試劑盒（批號２２１０１１）、膽固醇試劑盒（批號０５００３１），購自中生北控生物科技股份有限公司。高密度脂

蛋白膽固醇試劑盒（批號ＴＨ５１００９　）、低密度脂蛋白膽固醇試劑盒（批號０５１１０４Ｔ），購自上海紫興藥業(yè)

有限公司。

１．１．４高脂飼料由江蘇省協(xié)同醫(yī)藥生物工程有限責(zé)任公司配制提供（配方：８０．５％基礎(chǔ)飼料，１０％豬

油，４％白糖，５％雞蛋黃，０．５％膽鹽）。

１．１．５主要儀器７１５０自動生化（日本日立公司）；高效液相譜儀（美國Ｔｈｅｒｍｏ公司，ＰＤＡ

檢測器，７４０譜數(shù)據(jù)處理機。ＯＤＳ　Ｃ１８譜柱）；ＨＬ一２Ｓ恒流泵（上海青浦滬西儀器廠）；ＳＢＳ一１００數(shù)

控計滴自動部分收集器（上海青浦滬西儀器廠）；ＴＨ一５００Ａ梯度混合器（上海滬西器廠有限公

司）；ＲＥ一５２Ａ旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）。

１．２分析與實驗方法

１．２．１荷葉浸膏和黃酮類化合物的提取

荷葉粉末

６０％乙醇浸提

真空濃縮

一－￣－Ｊ卜浸提液一￣．－－一卜浸膏

堿水洗滌脫脂

過濾

濾液一大孔樹脂柱層析７０％ＬＲＩＭ９

收稿日期：２００６一０４一０２

基金項目：江蘇省自然科學(xué)基金（ＢＫ２００３０４４）０

作者簡介：黃阿根（１９６３一，男，江蘇泰州人，揚州大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院副教授，碩士，從事食品科學(xué)與工程研究；

施洪飛（１９６２一，男，江蘇揚州人，揚州大學(xué)體育學(xué)院副教授，博士，從事營養(yǎng)食療學(xué)研究

萬方數(shù)據(jù)

２００６年第３期

揚州大學(xué)烹飪學(xué)報

第２３卷總第８３期

洗脫液

濃縮

￣－一－－－－」卜真空烘干

荷葉黃酮

１．２．２荷葉生物堿的提取

荷葉粉末

氨水潤濕１０

一－－一－一－知－￣￣一

調(diào)節(jié)ｐＨ＝７．

一一．一－知

０

－．一一補氯仿浸提２次

浸提ｐＨ　＝２ｋＡ＊　?。颍惨匪崴?/p>

過濾

濾液

調(diào)節(jié)ｐＨ＝　

過濾

濾液

氯仿萃?。泊?/p>

神－￣一一－－－－－－－月卜氯仿層

真空濃縮

－一一－－－－－一一卜

真空烘干

荷葉生物堿

１．２．３黃酮和生物堿分析方法荷葉中總黃酮采用蘆丁為標(biāo)樣ＡＩ（ＮＯ３）３絡(luò)合分光光度法［５１；荷葉中

蘆丁含量采用ＨＰＬＣ分析法［［５１；荷葉生物堿采用嗅鉀酚綠比法［６１０

１．２．４血脂的測定方法膽固醇測定采用酶比法；甘油三醋測定采用酶比法；低密度脂蛋白測定

采用選擇性抑制法；高密度脂蛋白（ＨＤＬ一Ｃ）測定采用修飾酶法。

１．２．５動物實驗方法?。吃慢g雄性ＳＤ大鼠９０只，隨機分成９組，各組均以高脂飼料，自由取食飲

水。各試驗組按試驗劑量灌胃給藥，模型組以相同體積生理鹽水灌胃，減肥降脂膠囊劑量按同等單位質(zhì)

量人用藥量計算，荷葉黃酮生物堿用量參照經(jīng)驗給量［［２，７１，中劑量組分別與荷葉浸膏生藥用量相當(dāng)。飼

養(yǎng)２０天后，按實驗要求分別灌胃４０天后，禁食２４ｈ，乙醚麻醉、從腹主靜脈取血、制備血清，分別測血清

膽固醇（ＣＨＯ）、甘油三酷（ＴＧ）、高密度脂蛋白（ＨＤＬ一Ｃｈ）、低密度脂蛋白（ＬＤＬ　－?。茫瑁┖?。

采用ＳＰＳＳ統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，　　　　所得數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗后，組間比較用均數(shù)ｔ檢驗。

２實驗結(jié)果與討論

２．１荷葉黃酮質(zhì)量檢測

ｍＶ

別Ｓ

通過１．　　　?。玻车牟僮鞑襟E提取分離純化得到荷

葉黃酮樣品，化學(xué)吸光法分析得荷葉總黃酮的含們仃」

量為８９．０６％；將制備的黃酮樣品用酸水溶解，后

用氯仿萃取，以嗅甲酚綠吸光法檢測不出生物堿。０．００　　　　２．６２　　　?。担玻?，８８　　　?。保埃担啊　　　。保常保病　　。保担罚怠　　　。保福常浮　　。玻保埃啊。ǎ停椋睿酰簦澹?/p>

說明樣品提取純化后已有效去除生物堿。

２．２荷葉生物堿質(zhì)量檢測圖１生物堿樣品的ＨＰＬＣ圖譜

　　　　通過１．２．４的操作步驟，１　ｋｇ荷葉得生物堿１．?。玻罚?，通過計算生物堿樣品中總黃酮含量為

１９?。。罚常恚纾。耄纾保ǎ保埂。。罚常穑穑恚?，殘留蘆?。龋校蹋梅治鋈鐖D１所示，含量為２．１６５ｐｐｍ。說明生物堿中已有

效分離去除了黃酮類化合物。

２．３調(diào)節(jié)血脂功能實驗

　　　　按１．２．５操作方法建立高脂動物模型，分別對模型組、減肥降脂膠囊陽性對照組、荷葉浸膏、荷葉黃

酮、荷葉生物堿進(jìn)行動物實驗，實驗過程中生物堿、黃酮都是水難溶解，實驗過程中先用乙醇少量多次溶

解，再配以低含量的乙醇溶解（６％－８％），溶解后在熱狀態(tài)下，再蒸出大部分乙醇，配制的灌喂試液在存

放過程中會出現(xiàn)混濁，則需要在每次灌喂前微微加熱，用超聲波清洗器溶解，提高動物腸胃吸收效果降

低乙醇及樣品不溶性對實驗的干擾。實驗過程中大鼠活動正常，無腹瀉、死亡等不正?，F(xiàn)象。

灌藥前后大鼠的血脂水平見表１，　　　　從表中可見在所選劑量范圍內(nèi)，荷葉黃酮和生物堿使大鼠的膽固

醇（ＣＨＯ）含量有所降低，但無統(tǒng)計學(xué)意義；荷葉浸膏、高劑量組荷葉黃酮、高低劑量組荷葉生物堿可使

高脂血癥大鼠ＴＣ；顯著降低（Ｐ＜０．０５），荷葉生物堿中劑量組可使ＴＧ極顯著性降低（Ｐ＜０．０１）；各實驗

組對ＨＤＬ一Ｃ，?。蹋模桃唬盟綗o顯著性影響。從劑量水平上看，荷葉黃酮與荷葉生物堿的低、中、高劑量

所對應(yīng)的生藥劑量相當(dāng)，而浸膏用量相當(dāng)于黃酮、生物堿中劑量對應(yīng)的生藥，比較得出荷葉浸膏、生物堿

有顯著降低血脂ＴＣ；作用，而荷葉黃酮對應(yīng)的相同劑量生藥不如生物堿顯著。

從黃酮實驗劑量情況看，　　　　荷葉黃酮的實驗劑量中中低劑量各項指標(biāo)都未顯示出顯著性，高劑量指標(biāo)

有顯著性影響，故進(jìn)一步實驗時，應(yīng)適當(dāng)調(diào)整黃酮劑量范圍，進(jìn)一步考察黃酮對ＴＧ的影響。

一　?。玻匆?/p>

萬方數(shù)據(jù)

２００６?。危铮常茫酰欤椋睿幔颍。樱悖椋澹睿悖濉。剩铮酰颍睿幔臁。铮妗。伲幔睿纾瑁铮酢。眨睿椋觯澹颍螅椋簦郑铮欤。玻场。樱簦酰睢。危铮。福?/p>

表１高脂大鼠血脂變化情況（ｘ１：，ｎ＝１０）

組別

　　　　劑量ＣＨＯ

ＴＧ　　　　　　

Ｉ丑）Ｌ一Ｃ　?。蹋模桃唬?/p>

（ｍｇ．?。耄缫唬保?/p>

（ｍｍｏｌ．　Ｌ一１）

（ｍｍｏｌ．?。桃唬保?/p>

（ｍｍｏｌ．Ｌ一１）

（ｍｍｏｌ．?。桃唬保?/p>

　　　　模型組

１．６９士０．１９

１．２２士０．２１

１．１３士０．１６

０．６８士０．０７

減肥降脂膠囊１２３１．５６士０．２１

０．７４士０．１０＊

０．９８士０．１２０．６８士０．１５

荷葉浸膏　?。叮叮叮保叮凳浚埃玻?/p>

０．６５１０．１８二二

１．１１士０．１０

０．７０士０．１８

荷葉黃酮　　３０１．６９士０．３０

１．１９士０．２７　　

１．０３１０．２１

０．７５士０．１５

６０１．６３士０．２７

１．０８土０．２６　　

０．９９士０．２００．５９士０．１９

１２０

１．５５士０．２２０．９７士０．１６　　?。保埃呈浚埃保?/p>

０．５９士０．０９

荷葉生物堿

３．２

１．６７士０．２１

０．８９土０．１５二　　

０．９９士０．２３０．７１士０．１９

６．４１．６２士０．弓

乙

內(nèi)ｊ０．６９士０．１９１．１４士０．０６

０．６５士０．２０

１２．８１．５３士０．八ｊ４０．７７士０．２１?。。保玻笔浚埃保福埃叮甘浚埃保?/p>

與模型組比較：＊?。校迹埃埃担校迹埃埃保?/p>

ＣＨ（　　　?。┲笜?biāo)實驗組都未顯示出顯著性差別，而由許多研究實驗報道，荷葉浸提液有顯著降低動物膽

固醇作用［３］，這可能與本次實驗?zāi)懝檀冀２粔蚶硐胗嘘P(guān)，可能廠家配制的飼料中膽固醇含量不充足。

３結(jié)論

　　　　荷葉生物堿對調(diào)節(jié)血脂中甘油三醋?。ǎ裕牵┑闹笜?biāo)有顯著作用，而對應(yīng)于相同劑量生藥的荷葉黃酮不

如荷葉生物堿作用顯著，兩者對血脂其它指標(biāo)的影響有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

［１［唐春紅，幸宏偉，石軼松．黃酮提取液對大鼠高脂血癥及血液流變學(xué)參數(shù)的影響［Ｊｌ．第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，２００４，２６（７）：

６１６一６１７．　　　　

［２〕涂長春，李曉宇，楊軍平．荷葉生物總堿對肥胖高脂血癥大鼠減肥作用的實驗研究［Ｊｌ．江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，２００１，１３

（３）：１２０一１２１．　　　　

［３」關(guān)章順，吳?。扇~水提物對高脂血癥的降脂效果研究【Ｊ７．郴州醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校學(xué)報，２００３，５（３）：３一６．

［４］杜力軍，孫虹．荷葉大豆及其合劑調(diào)脂活性部位的研究［Ｊ］．中草藥，２０００，３１（７）：５２６一５２８．

［５］周蘭香，黃阿根，錢建亞．分光光度與ＨＰＬＣ法測定荷葉總黃酮的研究〔Ｊｌ．中草藥，２００２，３３（１）：３５一３７．

［６］蔣益虹．荷葉生物堿的提取工藝優(yōu)化．浙江大學(xué)學(xué)報［Ｊ］．２００４，３０（５）：５１９一５２３．

［７」吳吉茂，史玉梅，劉秋如．荷葉對家兔食餌性高膽固醇血癥和動脈樣硬化影響［Ｊｌ．江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報，１９８７，２７（３）：５一８．

Ａ　Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ?。樱簦酰洌。铮睢。拢欤铮铮洹。蹋椋穑椋洹。遥澹纾酰欤幔簦铮颍。疲酰睿悖簦椋铮?/p>

Ｂｅｔｗｅｅｎ?。疲欤幔觯铮睿铮椋洌蟆。幔睿洹。粒欤耄幔欤铮椋洌蟆。妫颍铮怼。蹋铮簦酰蟆。蹋澹幔?/p>

ＨＵＡＮＧ?。粒纾澹睿?，ＳＨＩ?。龋铮睿纾妫澹椋?，ＷＥＩ?。龋铮睿纾簦模希危恰。遥酰橐唬椋幔睿?，ＺＨＯＵ　Ｗｅｎ一ｕａｎｌ

（１．Ｓｃｈｏｏｌ?。铮妗。疲铮铮洹。樱悖椋澹睿悖濉。幔睿洹。裕澹悖瑁睿铮欤铮纾?，?。伲幔睿纾瑁铮酢。眨睿椋觯澹颍螅椋簦?，　Ｙａｎｇｚｈｏｕ?。玻玻担埃埃?，Ｊｉａｎｇｓｕ，?。茫瑁椋睿?；

２．?。樱悖瑁铮铮臁。铮妗。校瑁螅椋悖幔臁。牛洌酰悖幔簦椋铮?，?。伲幔睿纾瑁铮酢。眨睿椋觯澹颍螅椋簦。伲幔睿纾瑁铮酢。玻玻担埃埃?，?。剩椋幔睿纾螅?，?。茫瑁椋睿幔?/p>

Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｌｏｔｕｓ?。欤澹幔妗。椋蟆。纾铮铮洹。幔簟。猓欤铮铮洹。欤椋穑椋洹。颍澹纾酰欤幔簦椋铮睢。妫铮颉。簦瑁澹澹椋螅簦澹睿悖濉。铮妗。幔悖簦椋觯濉。妫欤幔觯铮睿铮椋洌蟆。幔睿洹。幔欤耄幔欤铮椋洌螅?/p>

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